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| 基于多功能纳米磁珠的DNA制备与基因分型 | |
| 作者姓名： | 谢欣 张旭 高华方 张欢 陈德朴 程京 费维扬 |
| 作者单位： | 1. 化学工程国家重点实验室,清华大学化学工程系,北京,100084;生物芯片北京国家工程研究中心,北京,102206 2. 四川农业大学理学院,雅安,625014;生物芯片北京国家工程研究中心,北京,102206 3. 清华大学生物科学和技术系,北京,100084;生物芯片北京国家工程研究中心,北京,102206 4. Department of Chemical Engineering Massachusetts Institute of Technology,Cambridge MA 02139 USA 5. 清华大学化学系,北京,100084 6. 化学工程国家重点实验室,清华大学化学工程系,北京,100084 |
| 基金项目： | 本工作为国家自然科学基金(批准号:39889001,39825108)及国家重点基础研究发展规划(批准号:G19990116)资助项目. |
| 摘 要： | 为了构建DNA样品制备芯片, 研发了一种以羧基修饰的磁性纳米粒子作为固相载体, 从全血、唾液和细菌培养基中快速提取基因组DNA并扩增靶基因的通用方法. 这种羧基修饰磁性纳米粒子不但可以从样品中富集靶细胞和从细胞裂解液中吸附DNA, 而且吸附在纳米磁珠表面的DNA可以不用洗脱而直接作为目标基因PCR扩增的模板, 从而通过功能集成简化了从靶细胞富集到靶基因扩增的全过程. 利用该方法实现了微量唾液样品中HLA基因的快速制备与扩增, 扩增产物与固定于寡核苷酸基因芯片上的16条探针杂交进行HLA基因分型, 取得了良好的效果. 由于该方法快速简便, 不使用有毒试剂和离心操作, 便于用以构建快速高通量的核酸制备微芯片. |
| 关 键 词： | 多功能 磁性纳米粒子 DNA微量制备 基因分型 芯片实验室系统 |
| 收稿时间： | 2003-09-22 |
| 修稿时间： | 2004-02-23 |
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