甜菜坏死黄脉病毒的分离提纯及其生物化学特性的研究

在甜菜坏死黄脉病毒分离提纯的研究中,获得了一个较好的提纯程序。用刚显症的新鲜番杏病叶,加PH8.4、0.2m的硼酸缓冲液(内含0.5％巯基乙醇,0.1m脲素、0.005mEDTA),捣碎过滤,6％PEG沉淀后,通过SePharose2B柱层析染纯化病毒。病毒经6％PEG再次沉淀浓缩后,调节病毒悬液PH至酸性使病毒易悬浮,并通过病毒等电点沉淀法进一步纯化病毒。纯化病毒制剂呈典型的病毒核蛋白紫外吸收曲线,最大吸收值在270毫微米,最小吸收值在250毫微米。该病毒分离物OD_(260)/OD_(280)为1.123左右,核酸含量约4.5％,病毒等电点PH4.8～4.9。病毒的核酸电泳出现4条带,它们的分子量约2.25×10~6、1.8×10~6、1.05×10~6、0.75×10~6道尔顿。病毒粒体含一种外壳蛋白亚基,分子量约2.05×10~6道尔顿,由约16种199个氨基酸组成。病毒制剂在分析超速离心时出现了4个沉降界面,它们各自的沉降系数分别为200.8S,165S,125.8S和100S。