| Paenibacillus sp.K1 β-半乳糖苷酶基因的克隆及在大肠杆菌中的表达 |
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| 作者姓名： | LU Wen-wei 孔文涛 SUN Zhi-lan 孔健 JI Ming-jie |
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| 作者单位： | 山东大学微生物技术国家重点实验室,山东,济南,250100;山东大学微生物技术国家重点实验室,山东,济南,250100;山东大学微生物技术国家重点实验室,山东,济南,250100;山东大学微生物技术国家重点实验室,山东,济南,250100;山东大学微生物技术国家重点实验室,山东,济南,250100 |
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| 基金项目： | 国家863高技术研究发展计划 |
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| 摘 要： | 从鲜牛奶中分离到1株产β-galactosidase的细菌,经16S rDNA序列比对鉴定为类芽孢菌Paenibacillus sp. K1。提取该菌株的染色体DNA,以pUC18（lac-）为载体,构建其DNA文库;在含有X-gal的LB平板上筛选该文库,得到6个蓝色菌落;对阳性克隆中插入的DNA片段序列测定,鉴定出1个编码全长为2028bp并携带有组成型启动子的β-半乳糖苷酶基因。将该基因导入大肠杆菌BL21（DE3）中,实现了β-半乳糖苷酶高效表达,其酶活为25.06U/mL,高于原始菌株的4.55U/mL,并进一步用亲和层析将该酶进行了纯化。
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| 关 键 词： | 类芽孢杆菌 β-半乳糖苷酶 DNA文库 |
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