| 乙型肝炎病毒HBx基因的shRNA重组表达载体的构建和鉴定 |
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| 引用本文： | 桑圣刚,王梦旖,肖 曼,杜冠魁.乙型肝炎病毒HBx基因的shRNA重组表达载体的构建和鉴定[J].中南民族大学学报(自然科学版),2018(4):55-60. |
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| 作者姓名： | 桑圣刚 王梦旖 肖 曼 杜冠魁 |
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| 作者单位： | 海南医学院 基础医学院，海口 571100 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金资助项目( 81360244) |
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| 摘 要： | 目的: 构建 pGenesil-3.1-HBx-shRNA 重组表达载体， 探讨其作用于 HepG2.2.15 细胞的生物活性． 方法: 构建了针对HBx基因的siRNA 表达载体，通过电穿孔法转染 HepG2.2.15 细胞，以荧光显微镜观察细胞的转染效率，QRT-PCR检测细胞中HBx基因的相对表达量，利用CCK-8细胞增殖检测试剂盒检测了细胞增殖活力，流式细胞术检测细胞凋亡．结果: 酶切和测序鉴定证实构建质粒含有HBx基因，QRT-PCR检测和荧光显微镜观察到构建的pGenesil-3.1-HBx-shRNA 可以在 HepG2.2.15 细胞中表达，HBx基因的表达下降了 28%(P＜0.05)，细胞增殖水平下降了47%(P＜0.05)，质粒 pGenesil-3.1-HBx-shRNA 转染后的HepG2.2.15 细胞凋亡率显著升高．结论: 乙型肝炎病毒HBx基因的shRNA重组表达载体构建成功，沉默HBx基因的shRNA能够抑制HBx基因的表达，且对HepG2.2.15细胞的增殖水平起明显的抑制作用．
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| 关 键 词： | 乙型肝炎病毒 HBx 基因 ＲNA 干扰，基因表达 |
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