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抗人FXYD3单克隆抗体的制备与初步鉴定
引用本文:马焕先,高丽杰,张爱群,周宁新. 抗人FXYD3单克隆抗体的制备与初步鉴定[J]. 科学技术与工程, 2011, 0(25)
作者姓名:马焕先  高丽杰  张爱群  周宁新
作者单位:1. 解放军总医院肝胆外科,北京,100853
2. 解放军总医院野战外科研究所,北京,100853
3. 第二炮兵总医院肝胆胃肠病研究所,北京,100088
摘    要:【摘要】目的 制备抗人FXYD3单克隆抗体(McAb)并鉴定其生物学特性。方法 以固相合成法获得的FXYD3合成多肽与载体蛋白KLH偶联后免疫BALB/c小鼠,采用杂交瘤技术制备抗人FXYD3 McAb。用ELISA 、Western Blot、免疫组化技术对抗人FXYD3 McAb的亚型、效价、亲和力及特异性进行鉴定。结果 筛选出两段较好的优势抗原表位,分别为NDLEDKNSPFY和KFGQKSGHHPGETPPLITPGSA获得四株可稳定分泌抗人FXYD3 McAb的杂交瘤细胞株02A12C4、02F1E8、02E6B10与03A10E11,亚型鉴定重链均为IgG1,轻链为kappa链。间接ELISA法测定效价均在为1∶104以上。其中02F1E8效价为1∶105以上,亲和常数为3.11?08 L / mol。免疫组化分析显示了FXYD3均匀分布于肝癌细胞与人胰腺癌Bxpc-3细胞系细胞的胞膜上。结论 成功制备了四株抗人FXYD3 McAb,其中02F1E8纯度好、效价高及特异性强。为进一步研究FXYD3在肿瘤组织及细胞系中的表达及临床意义奠定了基础。

关 键 词:离子通道调节子 FXYD3 杂交瘤细胞 单克隆抗体
收稿时间:2011-05-19
修稿时间:2011-05-30

Preparation and preliminary identification of monoclonal antibody against human FXYD3
ma huan xian,gao li jie,zhang ai qun and zhou ning xin. Preparation and preliminary identification of monoclonal antibody against human FXYD3[J]. Science Technology and Engineering, 2011, 0(25)
Authors:ma huan xian  gao li jie  zhang ai qun  zhou ning xin
Affiliation:2Institute of Field Surgery,Chinese PLA General Hospital,2Institute of Field Surgery,Chinese PLA General Hospital,The Second Artillery Hospital of PLA
Abstract:
Keywords:Ion transport regulator FXYD3 Hybridoma Monoclonal antibody
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