| 裂解多糖单加氧酶在毕赤酵母中的异源表达 |
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| 引用本文： | 姚昌阳,谢兴欢,蒋思婧,马立新,康立新.裂解多糖单加氧酶在毕赤酵母中的异源表达[J].湖北大学学报(自然科学版),2019,41(6). |
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| 作者姓名： | 姚昌阳 谢兴欢 蒋思婧 马立新 康立新 |
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| 作者单位： | 湖北大学生命科学学院,湖北武汉,430062;湖北大学生命科学学院,湖北武汉,430062;湖北大学生命科学学院,湖北武汉,430062;湖北大学生命科学学院,湖北武汉,430062;湖北大学生命科学学院,湖北武汉,430062 |
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| 基金项目： | 湖北省科技支撑计划项目 |
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| 摘 要： | 裂解多糖单加氧酶(lysate polysaccharide monooxygenase,LPMO)是一类含铜氧化酶,在还原型辅因子存在下可氧化裂解纤维素,对纤维素的降解起重要作用.优化并合成黄孢原毛平革菌(Phanerochaete chrysosporium)lpmo基因,构建pPICZ_αA-Pclpmo表达载体,电转毕赤酵母GS115实现了分泌表达,重组蛋白表达量为450 mg/L.重组PcPLMO对微晶纤维素催化活性为14 U/mL,对碱预处理的秸秆纤维活性较高,为24 U/mL.PcPLMO具有较好的热稳定性,分别在80、90、100℃保温60 min,残留活性为80%、62%与48%.经Endo H脱糖基化分析,PcLPMO发生了高度糖基化修饰,从而促进了酶的高温热稳定.相关结果可为LPMO协同纤维素酶降解纤维素的应用提供参考.
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| 关 键 词： | 裂解多糖单加氧酶 异源表达 热稳定 糖基化 |
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