| 粉尘螨过敏原脂肪酶的表达、纯化及生物信息学分析 |
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| 引用本文： | 幸鹏,刘玉琳,喻海琼,李盟,刘志刚,刘晓宇. 粉尘螨过敏原脂肪酶的表达、纯化及生物信息学分析[J]. 江西师范大学学报(自然科学版), 2015, 39(1): 101-105 |
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| 作者姓名： | 幸鹏 刘玉琳 喻海琼 李盟 刘志刚 刘晓宇 |
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| 作者单位： | 1. 深圳大学过敏反应与免疫学研究所,广东深圳,518060
2. 南昌大学医学院免疫学教研室,江西南昌,330006 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金，广东省高等学校国际暨港澳台科技合作创新平台项目，深圳市科技计划国际科技合作项目，深圳市科技计划基础研究项目，深圳市南山区研发项目 |
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| 摘 要： | 为克隆原核表达并纯化出粉尘螨过敏原脂肪酶蛋白,鉴定其免疫学活性,并分析其分子特征.通过重组合成粉尘螨新过敏原脂肪酶基因,与p ET-28a载体连接后转化大肠埃希菌E.coli Top10,用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达重组新过敏原脂肪酶蛋白;经镍柱亲和层析纯化出粉尘螨重组脂肪酶蛋白,用Western Blot、ELISA方法检测其免疫原性.用生物信息学软件预测其理化性质、二级结构,并构建分子进化树.成功表达纯化出高纯度的粉尘螨重组脂肪酶蛋白,十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)结果显示表达重组产物分子质量约为40 k Da,与理论值一致,纯化后的表达产物经Western blot印迹检测有明显条带显示.信息学分析显示蛋白二级结构由α螺旋(16.38%)、延伸主链(18.93%)、无规则卷曲(64.69%)组成.成功原核表达出粉尘螨过敏原脂肪酶蛋白,并纯化获得较高纯度及较强免疫学活性的重组脂肪酶蛋白,为尘螨过敏性疾病的特异性诊断和免疫治疗奠定理论基础.
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| 关 键 词： | 粉尘螨 过敏原 重组脂肪酶 生物信息学分析 |
Prokaryotic Expression,Purification, and Bioinformatics of Lipase,Arecombinant Allergen of Dust Mite |
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| XING Peng,LIU Yulin,YU Haiqiong,LI Meng,LIU Zhigang,LIU Xiaoyu. Prokaryotic Expression,Purification, and Bioinformatics of Lipase,Arecombinant Allergen of Dust Mite[J]. Journal of Jiangxi Normal University (Natural Sciences Edition), 2015, 39(1): 101-105 |
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| Authors: | XING Peng LIU Yulin YU Haiqiong LI Meng LIU Zhigang LIU Xiaoyu |
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| Affiliation: | XING Peng;LIU Yulin;YU Haiqiong;LI Meng;LIU Zhigang;LIU Xiaoyu;Allergy and Immunology Institute of Shenzhen University;Immunology Department of Nanchang University Medical School; |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | dust mites allergen recombination lipase bioinformatics analysis |
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