融合聚精氨酸九肽的小热休克蛋白 原核表达及蛋白纯化 |
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引用本文: | 常愉,宋文刚,陈丽,许梦然,关新刚.融合聚精氨酸九肽的小热休克蛋白 原核表达及蛋白纯化[J].北华大学学报(自然科学版),2019,20(1). |
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作者姓名: | 常愉 宋文刚 陈丽 许梦然 关新刚 |
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作者单位: | 北华大学药学院,吉林 吉林,132013;北华大学医学技术学院,吉林 吉林,132013;北华大学医学院,吉林 吉林,132013 |
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基金项目: | 国家自然科学基金;吉林省科技发展计划;吉林省科技发展计划;吉林省卫生计生委青年科技骨干培养计划项目;青年科研创新团队项目 |
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摘 要: | 目的构建小热休克蛋白-聚精氨酸九肽融合蛋白的原核表达载体,表达纯化融合蛋白.方法在小热休克蛋白表达载体的基础上利用点突变方法引入聚精氨酸九肽对应序列,转入BL21大肠杆菌感受态细胞进行原核表达,利用亲和层析方法对表达蛋白进行纯化.结果成功构建了融合聚精氨酸九肽的HSP16. 5融合蛋白表达载体,并对其在大肠杆菌细胞中的原核表达进行条件优化,研究显示:在诱导剂IPTG浓度为0. 5 mmol、37℃条件下诱导4 h目的蛋白产量较高.结论此实验成功构建了小热休克蛋白-聚精氨酸九肽融合蛋白的原核表达载体,得到了高纯度的小热休克蛋白-聚精氨酸九肽融合蛋白,为进一步研究其功能奠定基础.
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关 键 词: | 热休克蛋白 聚精氨酸 原核表达 亲和层析 |
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