| HproTα／hIL-2融合蛋白真核载体的构建及鉴定 |
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| 引用本文： | 周飞燕,黄明,韦剑,丘力功,卢柳燕,孙希海.HproTα／hIL-2融合蛋白真核载体的构建及鉴定[J].广西师范大学学报(自然科学版),2008,26(2). |
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| 作者姓名： | 周飞燕 黄明 韦剑 丘力功 卢柳燕 孙希海 |
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| 作者单位： | 1. 广西师范大学,生命科学学院,广西,桂林,541004
2. 广州拜迪生物医药有限公司,广东,广州,511495 |
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| 基金项目： | 广东省自然科学基金资助项目 |
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| 摘 要： | 利用基因重组技术构建了含信号肽的人源胸腺素α原和白介素2(proTα/IL-2)融合基因的真核表达载体pVAX-PI.用脂质体转染试剂转染COS-7细胞,转染后24、48、72、96 h采用ELISA法检测细胞培养上清中IL-2的表达情况,分别用CTLL-2依赖细胞株/MTT法和脾细胞增殖实验测定融合蛋白IL-2和proTα活性,采用ECL western blotting分析和鉴定目的蛋白的相对分子质量大小.结果表明,转染上清在31 kDa处有特异性阳性反应条带,质粒在转染COS-7细胞后不同时间均可进行分泌表达,且于转染后48 h目的蛋白的表达量达峰值.细胞转染上清中的IL-2活性可达58 IU/mL,proTa具有促进小鼠脾脏细胞增殖的作用,可作为基因治疗药物的开发之用.
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| 关 键 词： | 胸腺素α原 白介素2 融合蛋白 转染 |
Construction and Identification of Eukaryotic Expression Vector of Human Prothymosin a and Interleukin-2 |
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| ZHOU Fei-yan,HUANG Ming,WEI Jian,QIU Li-gong,LU Liu-yan,SUN Xi-hai.Construction and Identification of Eukaryotic Expression Vector of Human Prothymosin a and Interleukin-2[J].Journal of Guangxi Normal University(Natural Science Edition),2008,26(2). |
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| Authors: | ZHOU Fei-yan HUANG Ming WEI Jian QIU Li-gong LU Liu-yan SUN Xi-hai |
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