电化学发光成像分析法监测细胞表面粘蛋白及细胞形貌

在分子水平上理解细胞功能十分关键。文章以MCF-7细胞为目标细胞，粘蛋白（MUC1）为目标蛋白质，MUC1的特异性适配体为分子识别物质，建立了一种电化学发光成像分析新方法，监测外界刺激下特定细胞、细胞表面粘蛋白含量及细胞形貌的动态变化。结合生物条形码信号放大和Ru(phen)32+嵌入双链DNA信号转换技术，电化学发光成像灰度值与MUC1含量在8～2 000 pg/mL范围内呈良好的线性关系，检出限为2.1 pg/mL；与MCF-7细胞个数在50～1.0×104cells/mL范围内呈良好的线性关系，检出限为11 cells/mL。进一步应用该方法实时监测不同药物刺激下MCF-7细胞表面MUC1含量和细胞形貌的动态变化。结果发现芹黄素刺激下细胞表面MUC1含量降低，细胞皱缩，尺寸变小；过氧化氢刺激下细胞表面MUC1含量不变，细胞先膨胀，随后缩小。该方法为从细胞水平上灵敏分析蛋白质含量和细胞形貌提供了新思路，有助于理解不同生理过程中细胞形貌和分子机制的变化。