传染性喉气管炎病毒糖蛋白G基因的原核表达、细胞定位及功能研究 |
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作者姓名: | 孙照刚 张曼夫 |
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作者单位: | 中国农业大学生物学院动物分子病毒室,北京,100094;北京市结核病胸部肿瘤研究所细菌免疫学研究室,北京,101149;中国农业大学生物学院动物分子病毒室,北京,100094 |
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基金项目: | 感谢中国农业大学农业生物技术国家重点实验室在显微镜观测的支持和帮助.感谢中国农业科学院哈尔滨兽医研究所惠赠鸡抗ILTV多抗血清. |
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摘 要: | 克隆测定了传染性喉气管炎病毒(ILTV)北京E3和Zhonghai毒株的糖蛋白G基因(gG)序列, 并与多种动物的Ⅰ型α-疱疹病毒gG基因序列作了比对. 通过克隆gG基因至原核表达载体pET30a(+)构建pET30a-gG质粒, IPTG诱导表达含pET30a-gG重组质粒的阳性宿主菌后, 分离纯化得到分子量约35 kD的His-GG融合蛋白. 利用该融合蛋白制备的纯化的抗His-GG大鼠多抗血清, 观测ILTV糖蛋白G的在细胞上的分布, 发现糖蛋白G主要存在于宿主细胞的细胞核外周及细胞膜上, 在散在细胞内的分布较为分散, 而在融合细胞的结合部位分布较为集中. 利用抗体中和病毒糖蛋白G的实验结果表明, 糖蛋白G可能参与病毒从细胞到细胞的直接感染(CTCS), 从而影响病毒复制和噬斑的形成.
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关 键 词: | 糖蛋白G 原核表达 定位 功能 |
收稿时间: | 2005-02-16 |
修稿时间: | 2005-02-162005-07-08 |
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