| 鸡β_2-微球蛋白及其硒代衍生物的制备和晶体学研究 |
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| 作者姓名： | 张建华 高峰 彭浩 夏春 高福 |
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| 作者单位： | 张建华,高福,ZHANG Jianhua,GAO Fu(中国科学院微生物研究所,北京,100101;中国农业大学动物医学院,北京,100094);高峰,彭浩,GAO Feng,PENG Hao(中国科学院微生物研究所,北京,100101);夏春,XIA Chun(中国农业大学动物医学院,北京,100094) |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金重大项目 |
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| 摘 要： | 禽流感的暴发使得禽类免疫系统的研究显得愈加迫切.而以其他种属的同源β2-微球蛋白作为模板进行结构解析,不能解析鸡β2-微球蛋白(Chβ2m)的晶体结构.为了利用硒原子的反常散射获取Chβ2m晶体X射线衍射的相位信息.本研究以pET21a为表达载体,E coli BL21(DE3)为宿主菌,在含有硒代甲硫氨酸的M9培养基中,用IPTG诱导表达硒代甲硫氨酸Chβ2m.包涵体经提取和稀释复性法复性之后,通过分子筛层析和Resource Q阴离子交换层析进行纯化,产物经SDS-PAGE检验纯度达98%以上.利用悬滴气相扩散法采用与Chβ2m蛋白晶体生长相同的条件.获得了衍生物可供衍射的晶体.通过北京同步辐射装置收集数据,最高分辨率至1.9 A.
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| 关 键 词： | 鸡β2微球蛋白 硒代甲硫氨酸 晶体衍射 |
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