| 应用实时荧光定量PCR检测外源基因拷贝数的新方法 |
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| 引用本文： | 万艳,李丽玲,陈小佳.应用实时荧光定量PCR检测外源基因拷贝数的新方法[J].暨南大学学报,2009,30(3). |
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| 作者姓名： | 万艳 李丽玲 陈小佳 |
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| 作者单位： | 暨南大学生物工程研究所,广东,广州,510632 |
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| 摘 要： | 介绍一种采用实时荧光定量PCR法鉴定重组细胞株基因组中外源基因拷贝数的方法.首先根据研究对象建立标准品,以拟检测的外源基因设计特定的引物,得出标准曲线,然后在不同重组细胞株中对外源基因进行Real-Time PCR鉴定,根据结果与标准品比对得出实际的拷贝数.结果表明:以转染sPDGFRα基因的重组CHO-K1细胞为例,采用该方法,利用标准品制备的标准曲线具有较高的扩增效率和良好的线性关系,并且具有较大的线性范围(101-105拷贝);测得各重组细胞株外源基因拷贝数不同,3次独立实验表明结果一致.与传统杂交技术鉴定转基因拷贝数相比,该方法具有高效省时、更稳定、高通量和低成本等优点.
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| 关 键 词： | 外源基因 拷贝数 实时定量PCR |
A new method to tetermine the copy numbers of exogenous gene by absolute quantitative Real-Time PCR assay |
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| WAN Yan,LI Li-ling,CHEN Xiao-jia.A new method to tetermine the copy numbers of exogenous gene by absolute quantitative Real-Time PCR assay[J].Journal of Jinan University(Natural Science & Medicine Edition),2009,30(3). |
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| Authors: | WAN Yan LI Li-ling CHEN Xiao-jia |
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| Institution: | Bioengineering Institute of Jinan University;Guangzhou 510632;China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | exogenous gene copy number Real-Time PCR |
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