ChIFN-γ基因植物表达载体的构建与瞬时表达 |
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作者姓名: | 吴拥军 赵德刚 宋莉 许文钊 |
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作者单位: | 1. 贵州大学,生命科学学院,贵州,贵阳,550025;贵州省农业生物工程重点实验室,贵州,贵阳,550025 2. 贵州省农业生物工程重点实验室,贵州,贵阳,550025 3. 贵州大学,生命科学学院,贵州,贵阳,550025 |
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基金项目: | 国家科技支撑计划项目资助,中国国际合作项目资助,贵州省优秀青年科技基金项目资助 |
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摘 要: | 为了使鸡干扰素-γ(ChIFN-γ)基因在油菜中获得高效表达,优化了油菜偏爱的密码子,在ChIFN-γ的5′端添加Kozark序列,3′端增加内质网滞留信号肽SEKDEL.应用同尾酶将人工合成的ChIFN-γ,Napin特异性启动子及信号肽与NOS终止子克隆到质粒pSH中构建成植物表达载体pSH-NGN.经生菜瞬时表达,ELISA检测表明ChIFN-γ蛋白获得有效表达.研究结果为进一步遗传转化油菜奠定了基础,同时也对构建基因的正确表达提供了一种新的快速鉴定方法.
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关 键 词: | ChIFN-γ 同尾酶 构建 瞬时表达 |
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