凡纳滨对虾多酚氧化酶的纯化及性质分析 |
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作者姓名: | 鲍俊旺 李越 翁凌 张凌晶 孙乐常 曹敏杰 |
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作者单位: | 集美大学食品与生物工程学院,福建 厦门,361021;集美大学食品与生物工程学院, 福建 厦门361021;水产品深加工技术国家地方联合工程研究中心, 福建 厦门361021 |
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基金项目: | 福建省科技计划;厦门南方海洋研究中心项目 |
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摘 要: | 通过硫酸铵盐析、DEAE-Cellulose离子交换、Phenyl-Sepharose疏水层析、Hi-Trap Capto-Q强阴离子交换层析等方法,从凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)虾头中分离纯化出一种多酚氧化酶(polyphenol oxidase,PPO),十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electropheresis,SDS-PAGE)显示其分子质量约为210 ku。肽质量指纹图谱的比对结果表明,纯化得到的PPO中含有187个氨基酸残基的14个片段与NCBI数据库中酚氧化酶原(gi|147724160)序列相似性为100%。该酶的最适温度和最适pH值分别为40℃和6.0,且在温度0~50℃及pH=5.0~8.0可保持相对稳定的活性。圆二色谱分析结果表明,对虾PPO的二级结构主要为反平行结构及无规则卷曲。抗坏血酸、茶多酚和特丁基对苯二酚(tertiary butylhydroquinone,TBHQ)等具有生物活性羟基的抑制剂对其均有较好的抑制效果。
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关 键 词: | 凡纳滨对虾 多酚氧化酶 纯化 黑变 |
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