| 齿毛菌漆酶的基因克隆、异源表达及脱色研究 |
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| 引用本文： | 郑邦晓,余湘萍,叶秀云,林 娟,杨 捷.齿毛菌漆酶的基因克隆、异源表达及脱色研究[J].福州大学学报(自然科学版),2015,43(2):285-292. |
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| 作者姓名： | 郑邦晓 余湘萍 叶秀云 林 娟 杨 捷 |
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| 作者单位： | 福州大学生物科学与工程学院,福建省海洋酶工程重点实验室,福建福州350116 |
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| 基金项目： | 海洋公益性行业科研专项(2013418015),国家自然科学基金资助项目,福建省发改委生物产业技术开发专项(闽发改高技[2011]1598号),福州市科技局科技计划项目(2012-G-125),污染控制与资源化研究国家重点实验室开放课题资助(PCRRF12011),国家大学生创新性实验计划项目 |
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| 摘 要： | 通过简并PCR、TAIL-PCR、Site Finding PCR等方法从实验室前期筛选得到的一株齿毛菌中获得漆酶Lac基因(包括启动子)序列,将其c DNA转入Pichia pastoris X33中表达,以ABTS(2,2-azinobis-(3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid))为底物测定温度和p H对酶活及其稳定性的影响,并探究重组漆酶的脱色效果.结果表明,Lac DNA长3 129 bp,含有10个内含子,编码的Lac蛋白共有542个氨基酸,与已知漆酶氨基酸序列的相似性最高为60%,在5’端950 bp序列内发现多个可能的启动子元件;成功分泌表达重组漆酶r Lac,在含1 mmol·L-1铜离子的YP培养基中28℃发酵15 d达到酶活最高峰2.89 U·m L-1;酶学性质研究发现,r Lac的最适作用温度和p H值分别为55℃和3.0,且在p H 4~10及20~40℃有较好的稳定性;r Lac对靛类、偶氮类、三苯甲烷类等多种染料都有脱色效果.
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| 关 键 词： | 齿毛菌 漆酶 克隆 异源表达 酶学性质 脱色 |
Gene cloning, heterologous expression and decolorization study of a novel laccase gene from Cerrena sp. |
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| ZHENG Bangxiao,YU Xiangping,YE Xiuyun,LIN Juan and YANG Jie.Gene cloning, heterologous expression and decolorization study of a novel laccase gene from Cerrena sp.[J].Journal of Fuzhou University(Natural Science Edition),2015,43(2):285-292. |
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| Authors: | ZHENG Bangxiao YU Xiangping YE Xiuyun LIN Juan and YANG Jie |
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| Institution: | College of Biological Sciences and Technology,Fuzhou University,Fuzhou,College of Biological Sciences and Technology,Fuzhou University,Fuzhou,National Engineering Laboratory for Highly Efficient Enzyme Expression,Fuzhou;College of Biological Sciences and Technology,Fuzhou University,Fuzhou,National Engineering Laboratory for Highly Efficient Enzyme Expression,Fuzhou;College of Biological Sciences and Technology,Fuzhou University,Fuzhou,National Engineering Laboratory for Highly Efficient Enzyme Expression,Fuzhou;College of Biological Sciences and Technology,Fuzhou University,Fuzhou |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Cerrena sp Laccase Cloning Heterologous expression Enzymatic properties Decolorization |
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