大黄鱼源杀香鱼假单胞菌外膜蛋白OmpA的原核表达及免疫原性分析 |
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引用本文: | 汪浩,汪玮,许文军,施慧,何杰,谢建军,王庚申.大黄鱼源杀香鱼假单胞菌外膜蛋白OmpA的原核表达及免疫原性分析[J].浙江海洋学院学报(自然科学版),2019(1). |
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作者姓名: | 汪浩 汪玮 许文军 施慧 何杰 谢建军 王庚申 |
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作者单位: | 浙江海洋大学海洋与渔业研究所浙江省海洋水产研究所;浙江省海水增养殖重点实验室 |
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摘 要: | 外膜蛋白A(OmpA)是革兰氏阴性菌主要的外膜蛋白之一,在多种致病菌中表现出较强的免疫原性,是具有潜力的候选疫苗。为分析大黄鱼内脏白点病病原杀香鱼假单胞菌OmpA类外膜蛋白的免疫原性,本研究选取了杀香鱼假单胞菌基因组中存在的3个OmpA类重组蛋白(依次命名为P1,P2,P5,Genbank收录号分别为EPB94769.1,EPB94930.1,EPB95835.1),通过构建pET30a-OmpA表达载体、转化BL21诱导表达、His标签纯化等技术,获得3个纯化的OmpA类重组蛋白,分子量大小依次为25 kD(P1),32 kD(P2),35 kD(P5)。用制备的新西兰兔抗杀香鱼假单胞菌多克隆抗体,对获得的纯蛋白进行免疫原性Western Blot检测,结果表明:重组蛋白P1,P2,P5均能与兔抗发生特异结合,结合强度P5P2P1。本研究首次获得了杀香鱼假单胞菌OmpA重组蛋白并初步鉴定了其免疫原性,为杀香鱼假单胞菌的疫苗设计和筛选提供了有益参考。
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