| 大肠杆菌酒石酸脱氢酶β亚基的克隆、表达、纯化及包涵体的复性 |
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| 引用本文： | 徐燕,李永海,刘凤华,席慧,周霞,高音.大肠杆菌酒石酸脱氢酶β亚基的克隆、表达、纯化及包涵体的复性[J].首都师范大学学报(自然科学版),2005,26(3):68-71. |
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| 作者姓名： | 徐燕 李永海 刘凤华 席慧 周霞 高音 |
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| 作者单位： | 首都师范大学生命科学学院,北京,100037 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金项目(No.39800028)，北京市科技新星计划项目(No.96128) |
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| 摘 要： | 利用PCR技术从大肠杆菌BL21中获取酒石酸脱氢酶β亚基基因(TtdB),并将之克隆到质粒pUC18上,转化大肠杆菌DH5α细胞.经测序证明序列无误后,将之与表达载体pTrcHisC连接,在大肠杆菌BL21中经IPTG诱导表达,通过SDS-PAGE和双波长扫描分析,确定酒石酸脱氢酶β亚基在大肠杆菌中表达时以包涵体形式存在.目的蛋白用TALON金属亲和树脂纯化,通过分步透析逐步去除变性剂的方法复性.复性产率可达90%.
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| 关 键 词： | 酒石酸脱氢酶β亚基 基因克隆 诱导表达 包涵体 复性 |
| 收稿时间： | 2004-09-13 |
| 修稿时间： | 2004年9月13日 |
Cloning, Overexpression, Purification and Refolding of Escherichia coli Tartrate Dehydratase Beta Subunit |
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| Xu Yan,Li Yonghai,Liu Fenghua,Xi Hui,Zhou Xia,GAO Yin.Cloning, Overexpression, Purification and Refolding of Escherichia coli Tartrate Dehydratase Beta Subunit[J].Journal of Capital Normal University(Natural Science Edition),2005,26(3):68-71. |
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| Authors: | Xu Yan Li Yonghai Liu Fenghua Xi Hui Zhou Xia GAO Yin |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | tartrate dehydratase beta subunit gene cloning induced expression inclusion body refolding |
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