科罗索酸诱导细胞内ROS及Ca2+超载抗人结肠癌的研究 |
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引用本文: | 鲍晓文,张铭雅,王宇,朱志铭,马博.科罗索酸诱导细胞内ROS及Ca2+超载抗人结肠癌的研究[J].南京工业大学学报(自然科学版),2020,42(5). |
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作者姓名: | 鲍晓文 张铭雅 王宇 朱志铭 马博 |
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作者单位: | 南京工业大学 药学院,江苏 南京 211800;南京工业大学 药学院,江苏 南京 211800;南京工业大学 药学院,江苏 南京 211800;南京工业大学 药学院,江苏 南京 211800;南京工业大学 药学院,江苏 南京 211800 |
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基金项目: | 国家自然科学基金;江苏省先进生物制造创新计划 |
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摘 要: | 为了研究科罗索酸对人结肠癌SW480细胞的抗增殖、促凋亡作用及其机制,分别采用不同浓度的科罗索酸干预SW480细胞24和48 h后,用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞活力并计算半数抑制浓度(IC_(50));使用4,6-联脒-2-苯基吲哚(DAPI)染色以及Annexin V-FITC/PI双染检测科罗索酸诱导细胞凋亡的作用;通过单克隆实验考察科罗索酸对SW480细胞增殖能力的影响;采用2′,7′-二氯荧光素二乙酸酯(DCFH-DA)法和二氢乙啶(DHE)超氧化合物阴离子荧光探针法检测科罗索酸对SW480细胞内的活性氧(ROS)浓度的影响;荧光探针(JC-1)检测细胞线粒体膜电位;Ca~(2+)荧光探针Fluo-4AM检测细胞内Ca~(2+)浓度;蛋白质免疫印迹法检测科罗索酸对线粒体凋亡通路相关蛋白Cleaved Caspase-3、Bax、Bcl-2和Cleaved PARP表达的影响。结果表明:科罗索酸干预细胞24和48 h的半数抑制浓度分别为12.13和7.79μmol/L;低于半数抑制浓度的科罗索酸可以显著抑制SW480细胞的增殖;与空白对照组相比,科罗索酸(3.75、7.5和15μmol/L)干预SW480细胞后,其细胞凋亡率分别为20.05%、20.95%和31.60%,线粒体膜电位显著下降;同时,Cleaved Caspase-3、Bax和Cleaved PARP蛋白表达水平显著上升,Bcl-2表达水平显著降低,科罗索酸激活线粒体凋亡通路诱导SW480细胞凋亡。科罗索酸可以明显抑制SW480细胞的增殖并激活线粒体凋亡通路发挥抗肿瘤作用,其机制与上调细胞内活性氧浓度和Ca~(2+)超载有关。
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关 键 词: | 科罗索酸 结肠癌 细胞凋亡 活性氧 细胞内Ca2+ |
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