大白菜RAPD扩增体系的优化研究

以大白菜3411－7自交系为材料，使用PE公司生产的Thermal Cycler480型PCR仪，对影响大白菜RAPD扩增的因素进行了研究，确定了模板，Mg^2 ,dNTPs，引物和Taq DNA聚合酶的适宜浓度和最佳的循环次数。实验结果表明，在25μL反应体系中使用20－60mg的模板DNA，1.5-2.0mmol/L的Mg^2 ,0.15-0.25mmol/L dNTPs,0.8-1.0μmol/L随机引物，1.0-1.5U Taq DNA聚合酶，在94℃下预变性5min后执行94℃ 1min,37℃ 1min,72℃ 2min，35个循环，最后72℃再延伸5min的条件下，大白菜的RAPD扩增效果较好。