| 基因重组人Gamma-干扰素发酵和提取优化工艺的研究 |
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| 引用本文： | 张耀东,洪深求,张丽华,耿信笃.基因重组人Gamma-干扰素发酵和提取优化工艺的研究[J].陕西师范大学学报,1998(2). |
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| 作者姓名： | 张耀东 洪深求 张丽华 耿信笃 |
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| 作者单位： | 陕西师范大学化学系，西北大学现代分离科学研究所 |
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| 摘 要： | 对基因重组人Ｇａｍｍａ－干扰素（ｒＩＦＮ－γ）ＰＢＶ２２０ＤＨ５α工程菌株的发酵工艺进行了研究．结果表明，采用在２５０ｍＬ摇瓶中装液量为１５０ｍＬ，按照１∶４０的稀释比进行两次扩大培养，并在大肠杆菌生长最为活跃的对数生长期内进行诱导表达效果最好．收集菌体以后，将菌体进行冷冻和超声破碎，并在２．０ｍｏｌ／Ｌ脲中浸泡８ｈ～９ｈ以清洗杂蛋白，然后用７．０ｍｏｌ／Ｌ盐酸胍（Ｇｕ·ＨＣｌ）提取．在优化工艺条件下，ｒＩＦＮ－γ的收量为９．０×１０６ＩＵ／Ｌ～１２．８×１０６ＩＵ／Ｌ，总蛋白为７９．５ｍｇ／Ｌ～１２７．２ｍｇ／Ｌ，比活为５．６×１０５ＩＵ／ｍｇ～８．０×１０５ＩＵ／ｍｇ，ＳＤＳ－ＰＡＧＥ电泳含量可达６０％～８０％，使ＰＢＶ２２０ＤＨ５α工程菌株获得了高效表达．
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| 关 键 词： | 干扰素 发酵 菌体破碎 提取 包含体 |
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