嗜线虫致病杆菌抗生素基因簇克隆及遗传体系建立 |
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引用本文: | 吴蓉,汪桂,邓子新,陈文青,苏二正. 嗜线虫致病杆菌抗生素基因簇克隆及遗传体系建立[J]. 南京林业大学学报(自然科学版), 2019, 43(5): 175. DOI: 10.3969/j.issn.1000-2006.201602023 |
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作者姓名: | 吴蓉 汪桂 邓子新 陈文青 苏二正 |
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作者单位: | 1.南京林业大学轻工与食品学院, 江苏 南京 2100372.武汉大学药学院, 湖北 武汉 430072 |
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基金项目: | 国家自然科学基金面上项目(31270100) |
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摘 要: | 【目的】嗜线虫致病杆菌(Xenorhabdus)是昆虫病原线虫的共生菌,研究此共生菌分泌的抗菌活性的次级代谢产物基因蔟信息。【方法】通过直接PCR将目的基因簇分为数段扩增,利用天然酵母重组系统实现体外重组;同时采用果聚糖蔗糖转移酶基因sacB负筛选系统,通过两次同源臂重组构建基因敲除突变株,建立嗜线虫致病杆菌DSM 16338的遗传操作系统。【结果】成功获得推测目的基因簇;缺失所推测基因簇的3个相连基因,筛选到大片段缺失突变株GW2及调控基因敲除突变株GW4。【结论】利用高效的直接克隆方法获得了基因簇,成功对DSM 16338推测基因簇完成了基因中断,建立了该菌的遗传操作系统,为阐述此类细菌天然产物的生物化学多样性奠定了基础。
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关 键 词: | 嗜线虫致病杆菌 克隆 遗传体系 突变株筛选 |
收稿时间: | 2016-02-24 |
Directly cloning the gene cluster of potential nucleoside antibiotics and establishing the genetic manipulation system of Xenorhabdus szentirmaii DSM 16338 |
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Abstract: | |
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Keywords: | Xenorhabdus szentirmaii clone genetic system mutant screening |
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