| 灌木柳SlSIP基因的克隆和功能验证 |
| |
| 引用本文： | 周洁,黄婧,邢玮,王保松,何旭东,教忠意. 灌木柳SlSIP基因的克隆和功能验证[J]. 南京林业大学学报(自然科学版), 2019, 62(1): 39-44. DOI: 10.3969/j.issn.1000-2006.201808007 |
| |
| 作者姓名： | 周洁 黄婧 邢玮 王保松 何旭东 教忠意 |
| |
| 作者单位： | 江苏省林业科学研究院, 江苏 南京 211153 |
| |
| 基金项目： | 国家自然科学基金项目(31400572);江苏省自然科学基金项目(BK20141039) |
| |
| 摘 要： | 【目的】明确灌木柳碱性α-半乳糖苷酶基因(SlSIP)的结构特征和该基因在耐盐方面的生物学功能,为碱性α-半乳糖苷酶基因新的功能拓宽提供理论基础。【方法】 以灌木柳苏柳‘2345’(Salix jiangsuensis ‘2345’)盐胁迫48 h后的cDNA为模板,克隆了苏柳碱性α-半乳糖苷酶基因SlSIP。运用生物信息学方法分析其蛋白质结构、性质和亲缘关系,利用农杆菌介导法转入拟南芥中,通过实时荧光定量qRT-PCR方法鉴定转基因阳性植株的表达特性和盐胁迫条件下的生长状态,从而验证转基因植株的耐盐功能。【结果】该基因编码776个氨基酸,分子质量为84.88 ku,理论等电点为5.85,不稳定系数为35.74,亲水性平均系数-0.154, 定位于内质网膜上。SlSIP的保守结构域为WFGWCTW和IDDGWQ,催化活性位点为V。共得到11个T3代阳性转基因株系,qRT-PCR结果显示SlSIP在3个拟南芥阳性转基因株系中表达量最高,分别提高9、28、29倍。转基因株系在含85 mmol/L NaCl培养基上种子萌发率高于非转基因植株,且生长状态良好,但非转基因植株的叶绿素含量高于转基因株系。【结论】SlSIP基因属于GH27家族,不仅提高了种子萌发过程中的耐盐性,也参与了叶片发育和衰老的途径。
|
| 关 键 词： | 苏柳'2345’ 碱性α-半乳糖苷酶 耐盐 转基因 拟南芥 功能验证 |
Cloning and functional characterization of SlSIP from shrub Salix |
| |
| ZHOU Jie,HUANG Jing,XING Wei,WANG Baosong,HE Xudong,JIAO Zhongyi. Cloning and functional characterization of SlSIP from shrub Salix[J]. Journal of Nanjing Forestry University(Natural Sciences ), 2019, 62(1): 39-44. DOI: 10.3969/j.issn.1000-2006.201808007 |
| |
| Authors: | ZHOU Jie HUANG Jing XING Wei WANG Baosong HE Xudong JIAO Zhongyi |
| |
| Affiliation: | (Jiangsu Academy of Forestry,Nanjing 211153,China) |
| |
| Abstract: | ZHOU Jie;HUANG Jing;XING Wei;WANG Baosong;HE Xudong;JIAO Zhongyi(Jiangsu Academy of Forestry,Nanjing 211153,China) |
| |
| Keywords: | Salix jiangsusuensis ‘2345' alkaline α-galactosidase salt tolerance transgenic Arabidopsis thaliana functional annotation |
| 本文献已被 CNKI 维普 等数据库收录！ |
| 点击此处可从《南京林业大学学报(自然科学版)》浏览原始摘要信息 |
|
点击此处可从《南京林业大学学报(自然科学版)》下载全文 |
|
