| 重组人载脂蛋白AⅠ米兰突变体在酵母中的分泌表达 |
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| 引用本文： | 张彦,赵志安,王明贵,宋大新.重组人载脂蛋白AⅠ米兰突变体在酵母中的分泌表达[J].复旦学报(自然科学版),2008,47(3). |
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| 作者姓名： | 张彦 赵志安 王明贵 宋大新 |
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| 作者单位： | 1. 复旦大学生命科学学院微生物学与微生物工程系,上海,200433
2. 复旦大学附属华山医院抗生素研究所,上海,20040 |
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| 基金项目： | 复旦大学Med-X基金重点项目 |
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| 摘 要： | 将重组质粒pPIC9K-apoAⅠ-milano用BglⅡ酶切后转化Pichia pastoris GS115菌株,筛选得到G418高抗性转化子,经甲醇诱导和摇瓶发酵,用SDS-PAGE与Western blot检测上清液,发现有明显的重组人载脂蛋白AⅠ米兰突变体(rAIM)表达,但其分子量比正常蛋白小.对酵母工程菌的摇瓶发酵条件进行优化后,rAIM表达水平得到提高, 约为70 mg/L发酵液,其中正常大小的rAIM所占的比例约为80%.采用冷丙酮沉淀法初步纯化了酵母工程菌发酵液中的rAIM,并验证其有磷脂结合能力.
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| 关 键 词： | 载脂蛋白AⅠ米兰突变体 毕赤酵母 分泌表达 优化表达 |
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