带有REV-LTR片段的MDV野毒株GX0101 BAC克隆的构建及拯救病毒的致病性分析 |
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引用本文: | 孙爱军,PETHERBRID GE Lawrence,ZHAO Yu Guang,李延鹏,NAIR Venugopal K,崔治中.带有REV-LTR片段的MDV野毒株GX0101 BAC克隆的构建及拯救病毒的致病性分析[J].科学通报,2009,54(11):1541-1546. |
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作者姓名: | 孙爱军 PETHERBRID GE Lawrence ZHAO Yu Guang 李延鹏 NAIR Venugopal K 崔治中 |
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作者单位: | ① 山东农业大学动物科技学院, 泰安 271018;
② Institute for Animal Health, Compton, RG20 7NN, UK;
③ 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所, 北京 100081 |
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基金项目: | 国家自然科学基金(批准号: 30671571)和英国生物技术与生物科学研究理事会中国合作伙伴项目(BBSRC China Partnering Award)资助(编号: CPA1740) |
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摘 要: | 将整合有禽网状内皮组织增生症病毒(reticuloendotheliosis, REV)长末端重复序列(LTR)的马立克氏病病毒(命名为GX0101)全基因组作为细菌人工染色体(bacterial artificial chromosome, BAC)克隆进大肠杆菌. BAC载体通过同源重组插入MDV基因组的US2区, 含BAC载体的MDV DNA电转化大肠杆菌菌株DH10B, 鉴定含MDV全基因组的BAC克隆(MDV BAC), 提取BAC DNA, 转染原代鸡胚成纤维细胞(CEF), 成功拯救出了重组病毒, 命名为bac-GX0101. 将此病毒腹腔接种1日龄鸡, 在攻毒后62 d开始检测到内脏肿瘤, 动物实验结果表明, bac-GX0101毒株与亲本GX0101毒株对机体的致病性等方面的影响没有差异, bac-GX0101毒株仍然保留着很好的免疫抑制功能及致肿瘤能力. 该感染性克隆bac-GX0101为研究该重组野毒株中REV-LTR插入片段及其他基因的生物学功能提供了有用的技术平台.
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关 键 词: | 马立克氏病病毒 细菌人工染色体 REV-LTR |
收稿时间: | 2008-12-25 |
修稿时间: | 2009-04-03 |
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