破囊壶菌Δ4-脂肪酸脱饱和酶基因5'端侧翼区域的克隆与鉴定 |
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作者姓名: | 江贤章 陈金卿 田宝玉 高媛媛 舒正玉 李欣 蓝灿华 黄建忠 |
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作者单位: | 福建师范大学工业微生物教育部工程研究中心,福建,福州,350108 |
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基金项目: | 国家自然科学基金,福建省自然科学基金,福建省教育厅科研项目,福建省发改委重大项目,福建省科技厅科研项目,福建省青年科技人才创新基金 |
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摘 要: | 应用衔接头PCR(LA-PCR)技术,扩增得到约1000 bp的海洋破囊壶菌Δ4-脱饱和酶基因5’端侧翼区域的单一产物.对该产物测序,经启动子软件与序列比对分析,发现该序列(Genkbank登录号EU074209)具有真核启动子序列的基本结构特征,含有TATA盒、CAAT盒、INR等元件.将扩增得到的脱饱和酶基因5’端侧翼序列亚克隆到含有绿色荧光蛋白(GFP)报告基因的质粒pGlow-TOPO中,构建重组表达质粒,转化大肠杆菌细胞.荧光显微观察大肠杆菌阳性转化子发出荧光,侧翼序列含有启动子功能得到确认.
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关 键 词: | 破囊壶菌 脱饱和酶 衔接头PCR 启动子 绿色荧光蛋白 |
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