| 人白血病抑制因子基因在酵母中的融合表达 |
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| 引用本文： | 王全忠,杨林,欧阳菁,龙綮新,章?.人白血病抑制因子基因在酵母中的融合表达[J].中山大学学报(自然科学版),2001,40(5):96-99. |
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| 作者姓名： | 王全忠 杨林 欧阳菁 龙綮新 章? |
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| 作者单位： | 中山大学生物医药中心 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金项目(39800108) |
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| 摘 要： | 用PCR突变的方法使人白血病抑制因子基因的终止密码子缺失，并与质粒pPICZαA上的myc表位及6个组氨酸处于同一读码框，构建融合表达载体pPICZαA-hLIF^M。通过氯化锂化学转化法使表达载体整合到毕赤巴斯德酵母X－33的基因组DNA中，转化子经甘油增菌和甲醇诱导，实现了hLIF基因在毕赤酵母表达载体系统中的表达。SDS－PAGE检测和Western blot分析结果表明在相对分子质量为61000处有一条人白血病抑制因子特异蛋白带。凝胶薄层扫描分析结果显示表达的目的蛋白占培养液上清总蛋白的33．3％。且该表达产物具有抑制小鼠畸胎瘤细胞F9克隆形成的活性。
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| 关 键 词： | 人白血病抑制因子基因 毕赤酵母 融合表达 生物活性测定 |
| 修稿时间： | 2000年11月24 |
Fusion Expression of Human Leukemia InhibitoryFactor Gene in Yeast |
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