抑制消减杂交及反Northern结合高通量筛选食管癌中差异表达基因

为了解食管癌发生的分子遗传学机理，分离食管癌中差异表达的基因，应用抑制消减杂交（SSH）并与PCR合成双链cDNA，反Northern克隆相结合，成功地自微克级总RNA中分离出8个食管癌中差异表达的基因，其中已知基因5个、新基因片段3个，表达下调的6个、表达上调的2个，中－高丰度基因6个、低丰度基因2个，结果显示多个基因的表达改变参与了食管癌的发生发展，其中新发现的lipocortin I,cystatin A,cystatin B,cytoderatin等13个可能与食管癌的去分化、恶性增殖转化有关，SSH与PCR合成双链cDNA,反Northern筛选SSH克隆相结合，是一种高特异性、高通量的自微量RNA中检出差异表达基因的有效方法。