| 四川S.suis2强毒株溶血素样蛋白HLP序列信息分析及克隆表达产物活性检测 |
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| 引用本文： | 孙雯,郑峰. 四川S.suis2强毒株溶血素样蛋白HLP序列信息分析及克隆表达产物活性检测[J]. 成都大学学报(自然科学版), 2016, 35(3): 209-214. DOI: 10.3969/j.issn.1004-5422.2016.03.001 |
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| 作者姓名： | 孙雯 郑峰 |
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| 作者单位： | 扬州科技学院医学院,江苏扬州,225000;中国人民解放军南京军区军事医学研究所,江苏南京,210002 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金(31300119) |
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| 摘 要： | 对四川猪链球菌2型(S.suis 2)强毒株05ZYH33溶血素样蛋白(hemolysin-like protein,HLP)编码基因hlp进行序列信息分析、分子克隆表达及溶血活性检测,深入探讨HLP的致病机制.用Blast和Clustal X程序对HLP进行基因同源性分析,用Signal P 4.1和TMHMM Server 2.0分析HLP氨基酸序列.设计合成hlp引物进行PCR扩增,先后将hlp克隆入p MD-18T载体和p ET30a表达载体中,构建p ET30a::hly原核表达质粒.将重组质粒转化至E.coli BL21中诱导表达,并对重组HLP蛋白进行纯化和溶血活性检测.同源性分析表明HLP与多种具有溶血活性的蛋白相似性较高.氨基酸序列分析发现HLP具有信号肽和跨膜区,且由DUF21、CBS和Cor CHly C 3部分组成.序列测定显示hly片段全长1 335 bp,编码445个氨基酸.重组质粒经诱导表达和纯化后电泳显示,HLP分子量约为70 k Da,具有溶血活性.结果表明,HLP是一个膜结合蛋白,不同于能够分泌到细胞外的溶血素Suilysin.重组HLP具有一定的溶血效价,此可能与致病相关.
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| 关 键 词： | 猪链球菌2型(S.suis 2) 溶血素样蛋白 同源性分析 分子克隆 溶血活性 |
Sequence Information Analysis of Hemolysin-like Protein and Activity Detection of Cloning Expression Product in Highly Virulent Strains of Streptococcus suis Serotype 2 in Sichuan Province |
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| SUN Wen,ZHENG Feng. Sequence Information Analysis of Hemolysin-like Protein and Activity Detection of Cloning Expression Product in Highly Virulent Strains of Streptococcus suis Serotype 2 in Sichuan Province[J]. Journal of Chengdu University (Natural Science), 2016, 35(3): 209-214. DOI: 10.3969/j.issn.1004-5422.2016.03.001 |
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| Authors: | SUN Wen ZHENG Feng |
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