编码中国明对虾(Fenneropenaeus chinensis)一种组成型热休克蛋白70(HSC70)的cDNA克隆、测序及其表达分析 |
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作者姓名: | 焦传珍 王在照 李富花 张成松 相建海 |
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作者单位: | 1. 中国科学院海洋研究所,青岛,266071;德州学院生物系,德州,253023;中国科学院研究生院,北京,100039 2. 中国科学院海洋研究所,青岛,266071 |
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基金项目: | 本工作为国家重点基础研究规划(批准号: G1999012005)、国家高技术研究发展计划(批准号: 2001AA621120, 2003AA603440)、科学院知识创新方向性项目(批准号: ZKCX 2-211). |
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摘 要: | 根据中国明对虾(Fenneropenaeus chinensis ) EST序列信息设计引物,用RT-PCR方法,从经热休克处理的中国明对虾的肝胰腺RNA中克隆到长2090 bp的hsc70 cDNA序列,包括长1956 bp的完整编码序列(complete CDS)及部分5’端和3’端非翻译区(5’UTR 和3’UTR)。PCR及测序结果分析显示hsc70 cDNA的1~547 bp碱基所对应的基因组序列可能含有内含子,548~2090 bp碱基所对应的基因组序列不含内含子。根据编码序列推导出相应的652个氨基酸,与其他真核生物HSP70家族成员进行同源性比较,发现中国明对虾HSC70与虹鳟(Oncorhynchus mykiss) HSC71、人(Homo sapiens) HSC70、家鼠(Mus musculus )HSP70、烟草天蛾(Manduca Sexta )HSC70的相似性分别是85.9%、85.9%、85.8%、85.4%,表现出较高的保守性。表达分析显示,hsc70 mRNA在中国明对虾正常肝胰腺、肌肉、眼柄、血细胞、心脏、卵巢、肠和鳃等组织存在,并呈组成性表达;受到整体热休克后的对虾肌肉组织hsc70 mRNA水平(以β-actin mRNA水平为内标)与对照组没有显著的差异。
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关 键 词: | 中国对虾 HSC70 克隆 表达 |
收稿时间: | 2004-08-02 |
修稿时间: | 2004-10-22 |
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