| NPA motif在水通道蛋白AQP1表达和转水功能中的重要性 |
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| 引用本文： | 姜勇,麻彤辉.NPA motif在水通道蛋白AQP1表达和转水功能中的重要性[J].科学通报,2007,52(4):426-431. |
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| 作者姓名： | 姜勇 麻彤辉 |
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| 作者单位： | 东北师范大学膜通道实验室,长春,130024 |
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| 基金项目： | 国家杰出青年科学基金（批准号：30325011）、国家自然科学基金（批准号：30470405和30670477）、吉林省杰出青年科学基金（批准号：20030112）和教育部青年骨干教师资助计划资助项目 |
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| 摘 要： | 水通道蛋白(AQP)序列中的两个天冬酰胺-脯氨酸-丙氨酸序列(NPA motif)是水通道蛋白家族中高度保守的特征性序列, 其晶体结构研究显示, 两个NPA motifs位于通道中心的狭窄部位, 直接参与水分子的结合和选择性通过. 为了进一步研究两个NPA motifs在水通道蛋白结构、功能和生源学(biogenesis)方面的重要性, 通过点突变方法分别获得单独缺失NPA1或NPA2 motif以及同时缺失两个NPA motifs的3种水通道AQP1基因突变型. 将3种AQP1突变cDNA分别亚克隆入真核表达载体pcDNA3.1, 建立稳定转染3种AQP1基因突变型的CHO细胞系. AQP1免疫荧光分析显示, 3种AQP1突变蛋白均能正常表达并定位于质膜, 显示AQP1蛋白质表达和细胞内加工过程未受NPA motifs缺失的影响. 分别对表达3种AQP1突变蛋白的CHO细胞进行质膜水通透性功能分析, 并与表达野生型AQP1的CHO细胞进行比较, 结果显示, 缺失NPA1或NPA2引起AQP1转水功能下降49.6%和 46.7%, 而同时缺失两个NPA motifs的AQP1转水功能与野生型AQP1相似. 上述结果显示, 水通道AQP1中的NPA motifs在AQP1转水功能中发挥重要作用, 但对于AQP1蛋白的表达、细胞内加工和通道基本结构的形成并不起关键作用.
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| 关 键 词： | 水通道蛋白 NPA motif 突变 水通透性 生源学(biogenesis) |
| 收稿时间： | 2006-12-20 |
| 修稿时间： | 2006-12-202007-01-25 |
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