极端嗜热厌氧纤维素分解菌基因文库的构建及其内切葡聚糖酶基因片段的克隆

以从云南邦拿掌温泉中分离、纯化的高温厌氧纤维素分解菌邦2菌(Cadicellulosiruptor)为材料,制备其总DNA,经限制性核酸内切酶EcoRⅠ部分酶切后,在T4DNA连接酶的作用下与经EcoRⅠ完全酶切、去磷酸化的质粒载体pUC18连接,然后转化E.coliJM109,建立了邦2的基因文库,经筛选鉴定得到6.3×103个重组子;重组子经刚果红平板验证:约有23.5%菌落呈现透明圈;重组子经EcoRⅠ酶切验证显示:重组质粒均含有外源DNA插入片段.结果表明已克隆到邦2菌纤维素酶系中的内切葡聚糖酶基因(ED基因)片段.     

泥土芽孢杆菌YMTC1049菌株高温蛋白酶产酶条件的优化

 报道高温蛋白酶产生菌YMTC1049(Geobacillus sp.)产酶条件的优化过程.在基础培养基中分别添加葡萄糖、麦芽糖、酵母提取物、蛋白胨、胰蛋白胨、酪蛋白、聚胨等7种营养成分,获得对酶活影响较大的碳、氮源.用多因素正交试验设计考察了pH、酪蛋白、葡萄糖和温度对酶活的影响水平,菌株在优化发酵条件下培养24h时,上清液蛋白酶活力达312U/(mL·min).     

嗜热蛋白酶的研究与应用

介绍了国内外关于嗜热蛋白酶的研究成果与应用现状，包括产生嗜热蛋白酶的微生物种类，嗜热蛋白酶的特点、稳定机制及基因的克隆策略，嗜热蛋白酶的生产、提取、纯化以及应用．     

接种高温菌剂的生活垃圾好氧堆肥处理

接种适用于 70～ 80℃高温环境的高效微生物菌剂 ,进行中试规模的城市生活垃圾高温好氧堆肥处理试验研究 ,为上海市某区 50 0t·d- 1生活垃圾的产业化处理处置提供技术路线 .研究表明 ,接种高温菌剂的堆肥初始升温速度快 ,前 8h温度升高 3 7℃ ,而对照组前 13h堆肥温度仅升高 5℃ ;接种堆肥在前 3d高温期温度达到 80～ 85℃ ,有机物去除质量分数 19.2 % (前 3d) ,第 3d好气性异养细菌仍保持在 10 10 数量级 ;而对照组前 3d高温期的温度变化范围为 65～ 70℃ ,有机物去除质量分数为 11.9% (前 3d) ,第 3d好气性异养细菌降为 10 9数量级 ;接种堆肥较对照组发酵周期明显缩短 ,一次发酵缩短 3～ 4d ,二次发酵缩短了 6～ 7d .表明高温菌剂的投加 ,增强了微生物生态系统的功能 ,可以使堆肥的一次发酵阶段在高温条件下高效进行     

极端嗜热微生物分子伴侣蛋白研究与嗜热功能蛋白质的规模化制备技术研究

极端微生物是丰富的资源宝库,有着巨大的生物技术开发前景。本文从特殊功能蛋白质的发现与表征、结构与功能及潜在性应用．以及特殊功能蛋白质的规模化制备技术两个方面,对极端微生物的资源开发与利用进行了探讨。重点介绍了极端嗜热古菌Pyrococcus furiosus分子伴侣蛋白系统的一些研究,并以P．furiosus胞外α-淀粉酶PFA为例,对工业生物技术领域重组蛋白质的规模化制备技术进行了讨论。     

产耐热蛋白酶菌株的分离和酶性质的研究

从南汇县黄路乡一草堆下的土壤中分离到一株产耐热蛋白酶的链霉菌。该酶的最适反应温度为７０℃。在６０℃时稳定，当８０℃时处理１０ｍｉｎ，尚余８４％活性。在Ｃａ＾２＋存在的条件下，酶的热稳定性有显著提高。酶反应的最适ｐＨ为８．５，在ｐＨ５～９之间稳定，因此属于微碱性蛋白酶。通过抑制剂试验，该酶基本上被ＰＭＳＦ（苯甲基磺酰化合物）抑制，但不被金属螯合剂（ＥＤＴＡ，双吡啶）抑制。金属离子Ｃｕ＾２＋，Ｚｎ＾２     

耐热菌剂对堆肥有机质降解及细菌演替的影响

针对传统堆肥周期长、有机质降解效率低的问题,将耐热复合菌剂接种于餐厨废弃物高温堆肥中,研究其对有机质降解及微生物群落动态变化的影响。结果表明,接种耐热复合菌剂有利于：有机质降解,堆肥细菌群落丰富度和多样性的提高,厚壁菌门(Firmicutes)和尿素芽胞杆菌属(Ureibacillus)相对丰度的提高,冗余分析的结果表明,厚壁菌门(Firmicutes)对有机质降解的影响最强;网络分析结果表明,堆肥过程中尿素芽孢杆菌属(Ureibacillus)相对丰度的增加以及乳杆菌属(Lactobacillus)相对丰度的降低促进了有机质的降解。因此,接种耐热复合菌剂可以提高高温堆肥的质量和效率。     

高温厌氧颗粒污泥膨胀床中颗粒污泥的性质分析

考察了高温(55℃)条件下厌氧颗粒污泥膨胀床处理木薯酒精废水的运行特性和颗粒污泥的性质.结果表明,当进水有机负荷(OLR)在15.0 kg.m-3.d-1时,化学需氧量(COD)平均去除率为86.7%,平均产气量为15.1L.d-1.OLR最高可达24.0kg.m-3.d-1,COD平均去除率为88.5%,平均产气量为39.9L.d-1.颗粒污泥的颗粒化率随着运行时间的延长逐渐增加,运行至260d,直径大于2.00mm的颗粒污泥约占32%.颗粒污泥的有机组分主要是碳、氢和氮,无机组分主要是硅、磷、钙和铁.颗粒污泥表面的微生物以丝状菌为主,污泥内核组成可能主要为磷酸钙或碳酸钙等无机质.     

污水处理厂剩余污泥中高温厌氧消化对比试验

针对城市污水处理厂剩余污泥采取中温(33℃)和高温(57℃)厌氧消化对比试验,进行污泥减量化与资源化研究。结果表明:在高温条件下进行污泥消化处理要比中温下进行污泥消化处理的效率高出一倍;污泥投配率增加时,挥发性脂肪酸的浓度急剧上升,pH值下降,当反应器趋于稳定时,挥发性脂肪酸的浓度开始下降,相应的pH值也缓慢回升,污泥上清液碱度在每个投配率下基本上是呈先下降后上升的趋势;在高温下pH、VFA、碱度随着污泥投配率的变化要小于中温条件下消化反应的变化情况。     

微量量热法对嗜热菌、嗜冷菌热动力学性质的研究

应用极端条件下细菌生长的热动力学模型,用微量量热法研究嗜热菌,嗜冷菌的热动力学性质,分别测量了嗜热菌,嗜冷菌在不同温度下的生长热谱曲线,求出了细菌生长的动力学参数与活化态的活化参数,并通过计算机多元回归分析,得到了细菌生长的最佳生长温度及生长温度范围,试用非线性理论解释了细菌生长过程中熵增加的原因。