高产D-甘露醇虫草菌种分离纯化的研究

本试验系用生物工程技术分离纯化虫草菌种的研究。先用组织分离法从野生虫草整体组织上分离出虫草菌种 ,再用平板稀释法将菌种纯化 ,获得一株高产D -甘露醇 (虫草酸 )的优良菌种。该菌种被鉴定为蝙蝠蛾拟青霉。使用该菌种经一级种子培养和发酵培养 ,获得含D -甘露醇 9 9% (野生虫草约 7% )、总氮 5 1% (野生虫草约 4% )的虫草菌丝体。原种斜面培养基组成 (% ) :琼脂 2、葡萄糖 2、蛋白胨 0 2、磷酸二氢钾 0 1、硫酸镁 0 0 3、麦麸 5。种子培养基组成 (% ) ;葡萄糖 2、蛋白胨 0 5、磷酸二氢钾 0 1、硫酸镁 0 0 3、麦麸 5。原种培养温度 2 3- 2 4℃、培养时间 4- 5天 ;平均稀释纯化所用稀释菌液为 10 -1、 10 -2 、 10 -3 、 10 -4 、 10 -5、 10 -6,挑菌培养温度分别为 2 3- 2 4℃、 2 8℃、 37℃。种子培养条件 :一级种子培养 :摇床转速 180r/min ,培养温度 2 4- 2 5℃ ,时间 2 - 3天 ;二级种子培养 ;摇床转速 90r/min ,培养温度 2 4- 2 5℃ ,时间 2天。发酵培养条件 ;接种量 5 - 10 % ,温度 2 4- 2 6℃ ,搅拌速度 15 0 - 180r/min ,通气培养 ,时间 5 - 6天 ,PH4 5 ,残糖量降至 0 3%。     

冬虫夏草人工培育初探

通过采用周期性变压固态发酵技术来探讨其在人工培育冬虫夏草工艺中的可行性。实验中通过正交对比实验确定了最佳实验条件 :固体培养基为大米或大米 +麸皮 ,固液比为1∶ 1～ 1.3,温度为 2 8℃ ,p H值 7.5～ 8,时间为 (15～ 2 0 ) d。周期变压条件为 :高压 0 .15MPa(表压 )时间 :10 min,低压 :0 .0 0 MPa(表压 )时间 :10 min,菌丝体的生长时间缩短了 (5～ 10 ) d,虫草多糖的得率明显的提高。     

新型蚕蛹虫草对小鼠免疫增强作用的实验研究

目的观察新型蚕蛹虫草对小鼠免疫器官、巨噬细胞吞噬功能及抗体生成的影响.方法采用腹腔巨噬细胞功能测定法和免疫器官重量法及溶血素测定法,观察吞噬百分数、吞噬指数,取脾脏、胸腺称重,计算脾指数、胸腺指数、溶血素的生成.结果新型蚕蛹虫草能显著提高实验动物脾、胸腺的重量,且小鼠的腹腔巨噬细胞(Mφ)数量及吞噬活性明显提高.随着剂量的增加,吞噬百分率、吞噬指数与对照组相比明显增加;并可明显提高小鼠血清溶血素(抗体)的产生水平.结论新型蚕蛹虫草对小鼠免疫器官和网状内皮系统吞噬功能有明显的激活和增强作用;可明显增加B淋巴细胞产生抗体的能力,增加机体的体液免疫功能.     

不同氮源对北冬虫夏草生长影响的研究

以硝酸钾、蛋白胨、黄豆粉、硫酸铵、尿素5种不同氮源对北冬虫夏草的菌球数量、干重,菌丝生长状况及子实体的鲜重和干重进行研究．结果表明：液体培养的菌球最多的是蛋白胨,其次是黄豆粉．最差是硝酸钾;固体斜面培养基从菌丝长势来看最好是蛋白胨,最差的是硝酸钾。北冬虫夏草最佳的氮源是黄豆粉。     

古尼虫草对苏云金杆菌抗紫外辐射的保护作用

用古尼拟青霉（paecilomyces gunnii)不同生长天数的培养液所培养的苏云金杆菌（bacillus thuringiensis)经紫外辐射后,其活菌数有很大差异。说明古虫尼草处于稳定生长期的培养液中所含抗紫外辐射的成分最高;古尼拟青霉的培养液、古尼虫草（cordyceps gunnii)子实体浸提液所培养的苏云金杆菌经紫外辐射后,活菌数依次对比对照提高,说明了抗紫外辐射的成分在古尼虫草子实体浸提液和菌丝体浸提液中的含量比较高,在古尼拟青霉培养液中较低。     

冬虫夏草体外溶出度研究

依据《药典》中的溶出度测定法进行冬虫夏草纳米粉胶囊、冬虫夏草粗粉胶囊及冬虫夏草药材的体外溶出实验.实验显示,冬虫夏草药材在10 min时溶出最多,冬虫夏草纳米粉胶囊及冬虫夏草粗粉胶囊都在40min时达到溶出最高点,而纳米粉溶出度高达100%.结果表明,装入胶囊的冬虫夏草粉比未装入胶囊的冬虫夏草药材,溶出度稳定,且冬虫夏草纳米粉溶出度最高.     

分子荧光测定蛹虫草中硒的含量

采用分子荧光法测定蛹虫草富硒前后硒的含量，优化了测定条件，研究不同的消解方法对测定的影响，为蛹虫草富硒培养条件的筛选提供了准确快速的测定方法．     

高效液相色谱法测定蛹虫草中腺苷的含量

建立了反相高效液相色谱法测定蛹虫草中腺苷含量的方法.在选定条件下,测定腺苷的线性范围为1.27～50.5μg/mL,检出限量为0.18ng.回收率平均值为103.4%,RSD为0.367%.该方法灵敏、快速、准确,对人工培植虫草中腺苷的进行了检测,结果满意.     

亚香棒虫草药用价值初探

用产于山西省的亚香棒虫草为研究材料,通过对原寄生昆虫种类的鉴定和亚香棒虫草体内氨基酸组成和含量分析,主要微量元素及含量测定与冬虫夏草进行对比,结果发现三种亚香棒虫草的１８种氨基酸的总含量均高于冬虫夏草,其平均值分别高于冬虫夏草０．１１３ｍｇ／ｇ、０．１９８ｍｇ／ｇ、０．１１８ｍｇ／ｇ。微量元素的数值相近似,因此其药用价值是可以肯定的,这表明亚香棒虫草作为冬虫夏草的代用品是有着良好的前景     

蛹虫草废弃培养残基中虫草素的提取工艺研究

优化并比较了微波辅助和超声波辅助提取蛹虫草培养残基中虫草素的工艺方法.采用L 9(34)正交试验设计,考察了料液比(g:mL)、乙醇含量(%)、微波功率(微波法)或提取温度(超声波法)、提取时间等4个因素对虫草素提取率的影响.结果表明:微波提取以25倍料液比、40%乙醇、240 W下微波提取1.5 min,提取2次为最佳工艺,该条件下浸膏得率为28.33%,虫草素含量为0.378 mg/g;超声波提取在45 kHz功率下,以25倍料液比、40%乙醇、60℃下超声提取30 min,提取2次为最佳工艺,该条件下浸膏得率为38.24%,虫草素含量为0.362 mg/g.比较了超声波提取2次、微波提取2次、微波—超声波联合提取以及超声—微波联合提取等方式对虫草素的提取效率,最终确定微波提取2次为最佳工艺,该工艺适用于蛹虫草培养残基中虫草素的快速高效提取.