玉米渣纤维降解菌LMPQ39菌丝原生质体诱变的研究

对担子菌ＬＭＰＱ３９菌丝原生质体进行了紫外光──ＬｉＣｌ复合处理后，得到突变株Ｕ３９，再将其分别用６０Ｃｏ、ＨＮＯ２两种方法处理，各获得突变株ＵＣｏ３９和ＵＮ３９，它们的ＣＭＣ酶活由原来ＬＭＰＱ３９的０．３１ｕ分别提高到０．４６ｕ和０．５７６ｕ．酯酶同功酶电泳表明，ＵＣｏ３９、ＵＮ３９和母株ＬＭＰＱ３９的酶谱出现了６条共同的谱带，同时也出现差异．突变株和母株的拮抗试验呈阳性。     

担子菌LMPQ39与CSP的原生质体融合

本文以有抗菌作用的担子菌ＣＳＰ的高温敏感性为标记，将ＣＳＰ的原生质体与经热灭活的ＬＭＰＱ３９原生质体融合．融合条件为３０％的ＰＥＧ－６０００，３０℃温度下处理２０ｍｉｎ．融合后得稳定融合子１株（Ｆ１），融合频率为１．１×１０－４．对融合子的初步生化分析表明：其抗菌试验呈阳性；ＣＭＣ（按甲基纤维素）酶活为０．３０８Ｕ；玉米粒上生长良好；其酯酶同功酶谱异于双亲但在双亲谱带范围内，并偏近于ＬＭＰＱ３９．对其外观形态、显微结构及超显微结构的观察表明：融合子的形态结构异于亲株但遍近ＬＭＰＱ３９．     

担子菌LMPQ39 Pst Ⅰ片段基因库的构建

担子菌ＬＭＰＱ３９　Ｐｓｔ　Ⅰ片段基因库的构建王灿华，吴其威，黄瑞珊，朱章玉，李堃宝（生物技术研究所）关键词担子菌ＬＭＰＱ３９，ＰｓｔⅠ酶切，质粒ｐＢＲ３２２，克隆库中图法分类号Ｑ７５当今的育种工作，除使用常规手段外，主要是从分子水平和细胞水平两个层...     

三种方法制备担子菌LMPQ39大分子量DNA的研究

三种方法制备担子菌ＬＭＰＱ３９大分子量ＤＮＡ的研究王灿华，黄瑞珊，朱章玉，吴其威，李堃宝（生物技术研究所）关键词担子菌ＬＭＰＱ３９，大分子量ＤＮＡ，原生质体法中图法分类号Ｑ７５１９５３年Ｗａｔｓｏｎ和Ｃｒｉｃｋ提出ＤＮＡ双螺旋结构后，人们才认识到抽提...     

担子菌LMPQ39和CSP菌丝原生质体分离和再生的研究

本文以蜗牛酶和纤维素酶的混和酶液作为脱壁酶，通过酶解试验比较了菌龄，酶解时间，酶解温度及酶液浓度等对担子菌ＬＭＰＱ３９和ＣＳＰ菌丝原生质体分离的影响，通过原生体再生试验，比较了渗透压稳定剂对ＬＭＰＱ３９和ＣＳＰ菌丝原生质体再生的影响，获得了１０＾５－１０＾８数量级的原生质体再生菌落，同时，本文还对ＣＳＰ原生质体再生过程的形态变化作了适当的描述。     

荷伯生氏斜盖伞的同核体菌株制备

【目的】笔者前期从栎树外生菌根根尖组织中分离得1株真菌:荷伯生氏斜盖伞(Clitopilus hobsonii),发现其对苗木具有促生效应。研究旨在获得该菌的同核体菌株,为荷伯生氏斜盖伞高质量基因组数据的获得及其对植物的促生作用机制研究奠定基础。【方法】通过原生质体再生技术得到候选菌株,基于候选菌株与出发菌株的生长性状及菌落形态特征比较、RNA聚合酶Ⅱ基因(RNA polymerase Ⅱ gene,rpb2)和翻译延伸因子基因(translation elongation factor 1-α gene,tef)两个单拷贝保守基因片段的杂合性分析,以及DAPI(4',6-二脒基-2-苯基吲哚)细胞核荧光染色观察,确定获得的再生菌株为同核体。【结果】经分离培养发现:其中一类再生菌株与出发菌株的菌落形态特性相比差异明显,且该再生菌株生长速度较慢;镜检结果表明,再生菌株与出发菌株均不存在锁状联合结构;DAPI细胞核荧光染色结果表明出发菌株菌丝细胞中均含有两个细胞核,而再生菌株初生菌丝中可观察到仅含1个细胞核的细胞结构,后期则发生双核化;rpb2和tef片段序列比对结果进一步表明出发菌株存在多个杂合位点,而在再生菌株中则未发现。【结论】本研究制备的再生菌株为荷伯生氏斜盖伞同核体菌株,具有单一、稳定的遗传信息,可为异核体真菌基因组数据的获得提供材料基础。