高山红景天花粉的超低温保存

对来自大兴安岭、长白山的高山红景天花粉进行了超低温保存研究。结果表明:不同的干燥时间对超低温保存后花粉萌发力有明显影响,12 h干燥处理的花粉萌发力明显高于8 h、24 h干燥处理的;用0℃(8 h)→-10℃(8 h)→-20℃(8 h)变温预冻处理能大幅提升超低温保存后花粉的萌发力;超低温保存后的解冻方式以-20℃(8 h)→4℃(8 h)→25℃(8 h)为最佳。     

保护剂浓度对第19期鸡胚原始生殖细胞存活率的影响

采用Ficoll密度梯度离心 ,提取第 19期 (孵化 72h)性腺中的原始生殖细胞 (PGCs) ,用不同浓度的冷冻保护液进行冷冻保存。复苏后的PGCs用台盼蓝染色检测其存活率 ,并进行体外培养。结果发现 :在同一浓度下 ,不同的冷冻保护液之间存在显著 (P <0 0 5 )或极显著 (P <0 0 1)差异。在同一种冷冻保护液下 ,不同的浓度之间存在显著(P <0 0 5 )或极显著 (P <0 0 1)差异 ,具体表现为冷冻保护液浓度越大 ,复苏后细胞的存活率越低。PGCs复苏后于体外培养 ,可增殖形成细胞克隆 ,并可传代培养     

两种蓝藻超低温保存抗冻保护剂的研究

以两种蓝藻为试材,对影响超低温(液氮温度-196℃)保存成活率的保护剂及其配比进行了探讨,发现非渗透保护剂(蔗糖)比渗透性保护剂(DMSO)效果好,混和保护剂与单一蔗糖为保护剂的处理效果未见区别,由两种方法所测成活率看鱼腥藻(Anabaena sp.)比钝顶螺旋藻(Spirulinaplatensis)的抗寒性高.     

抗冻剂在溶液固化过程中对电势影响的实验探讨

本文对纯水及加抗冻剂的溶液在固化相变过程中的电势变化情况进行了实验研究。实验结果表明,加抗冻剂的溶液电势变化较缓慢平稳且峰值较小。文章就电势变化现象对抗冻剂的保护机理作了初步探讨。     

Cryopreservation of parasites

Summary In this review, advances in cryopreservation of helminth parasites are reported. Our own studies demonstrate that metacestodes ofEchinococcus multilocularis can be maintained in a viable state for at least 1–2 years by appropriate deep-freezing and storage in liquid nitrogen. Infective larvae of the nematodeToxocara canis cryopreserved for 1 week in liquid nitrogen were maintained after thawing in vitro in a chemically defined medium for 35 weeks. Although motility of previously deep-frozen larvae was reduced they produced secretory/excretory antigens of similar immunodiagnostic quality as those from unfrozen larvae. Whereas infective larvae of several species of trichostrongylids can be easily cryopreserved, the infective larvae of the cattle lungworm,Dictyocaulus viviparus, and muscle larvae ofTrichinella spiralis are more sensitive to damage by subzero temperatures. Therefore, survival rates after cryopreservation are low, but improvement of the cooling schedules appears to be feasible. It is concluded that cryopreservation of certain stages of helminth and protozoan parasites is a useful technique for long-term storage of defined isolates, which can contribute considerably to reducing the number of experimental animals usually required for serial passages.     

几种不同楸树花粉萌发率的测定及花粉超低温保存方法

对5种不同楸树(楸树、滇楸、梓树、灰楸和黄金树)花粉萌发率的研究表明:花粉在恒温25℃培养6 h时萌发率较好,培养基为:10%蔗糖 0.01%硼酸 1%琼脂。在室温水培条件下,花粉在3 d内都保持较好的萌发率,第4天至第7天萌发率快速下降。花粉在液氮和-70℃条件下贮藏生活力较好,随贮藏时间延长生活力下降幅度也较小;常温贮藏时花粉萌发率最低,且生活力丧失快;而0℃和-20℃贮藏花粉生活力居中。超低温保存后花粉的解冻方式对花粉的萌发率影响较大,楸树各树种均以温水浴(35~38℃)下解冻5 min效果最好。     

龙井茶茶树种质资源低温保存特性研究

针对茶树种子在国际种质资源库建设标准下(干燥至3%~7%的含水量,-20℃保存)长期保存的可能性,研究了龙井茶种子的脱水敏感性及低温保存特性。结果表明:龙井茶不是顽拗性种子,当含水量在7%~9%时,其生命力最为旺盛;在-20℃环境下保存超过1星期后,其活性显著降低,超过3个月后种子全部失活。通过冷冻干燥技术和扫描电镜,观察了茶种子内部胚轴、胚乳和断面形态,发现当保存温度维持在-20℃时,种子失活的原因很可能是内部遭受了冰晶破坏性的损伤。     

Lats基因敲除小鼠胚胎玻璃化冷冻的研究

用冷冻麦管、细胞冷冻管分别采用一步法和二步法对Lats基因敲除小鼠胚胎进行玻璃化冷冻 ,胚胎解冻后 ,囊胚发育率分别为 90 %、90 1%、89 2 %和 91 4 % ;移植后着床率分别为 :5 0 0 %、4 7 1%、4 3 4 %和 4 6 5 % ,差异不显著 ;并且与对照组相比差异也不显著。因此 ,玻璃化冷冻可以作为Lats鼠保种方法之一     

遗传工程小鼠冻存卵巢异体原位移植比较研究

目的 对 C57BL / 6 J 为背景的遗传工程小鼠卵巢冷冻及复苏后原位移植进行研究,建立遗传工程小鼠卵巢 冷冻方法,弥补小鼠资源保种体系。 方法 采用 DAP213 方法冷冻保存了 C57BL / 6 J 及 SCARB2、PSGL1、IGB3S 三 个遗传工程小鼠 10 日龄幼鼠的卵巢,将四个品系 10 日龄幼鼠的新鲜卵巢及冻存复苏卵巢原位移植到 4 周龄 C57BL / 6 J 及 C57BL / 6 J( Cg) —Tyrc- 2 J / J( B6 albino)受体雌鼠,术后饲养 5 周与 10 周龄性成熟 C57BL / 6 J 雄鼠交 配,观察移植出生幼仔。 结果 C57BL / 6 J 新鲜卵巢和冻存卵巢,三个品系遗传工程小鼠的冻存卵巢原位移植到 C57BL / 6 J 和 B6 albino 受体中,均可以恢复正常功能,交配后得到仔鼠。 结论 采用 DAP213 方法冻存 C57BL / 6 J 及以 C57BL / 6 J 为背景的遗传工程小鼠卵巢,复苏后原位移植到 C57BL / 6 J 和 B6 albino,交配后产仔,卵巢冻存方 式是小鼠资源库保存的一个重要补充。