γ干扰素工程菌发酵工艺研究

在摇瓶培养及恒化培养研究的基础上,对含温度敏感型质粒γ干扰素工程菌高密度、高表达的发酵工艺作了探讨。摇瓶培养结果表明,菌体的良好生长状态对外源基因表达起着重要作用,工程菌于对数后期升温,干扰素滴度最高。以葡萄糖为限制性基质的恒化培养,得出了工程菌细胞生长得率与比生长速率之间的关系,同时表明工程菌升温表达前的比生长速率对表达后干扰素的比活有影响,比生长速率在0.10～0.15h~(-1)时比活最大。通过碳、氮、镁的间歇流加培养与连续流加培养,均使工程菌达到高密度与高表达,但以控制比生长速率为目的的连续流加培养较间歇流加比活提高近4倍,棕1.1×10~(10)IU/L。     

福州市城市生活饮用水水源地水质状况及大肠杆菌生长影响因素的研究

为了解福州市城市生活饮用水水泺水质状况，于2004年～2007年分别对福州市主要的6个水泺地的水质状况每月进行一次取样，进行化学指标及毒理学指标的检潮分析。置测结果表明，福州市主要供水的原厝、义序、董峰洲、马尾、城门、塘坂水源水质合格率较高，毒理学指标和化学指标全部达标。城门，义序、董峄洲水厂的部分指标数值较高。主要项目为大量杆菌。水体中细菌数量的变化与有机磷含量有一定的相关关系。本文进一步就洗衣扮中的磷对大局杆筒的生长影响进行了研究，结果表明洗衣粉中的磷对大所杆茸有明量的促生长效果。     

樱桃谷雏鸭血清蛋白电泳分析——大肠杆菌灭活苗免疫前后球蛋白的动态变化研究

本试验将1日龄樱桃谷雏鸭57只随机分成三组,对照组、免疫Ⅰ组和免疫Ⅱ组.每组19只.免疫Ⅰ组于第3、4、5周龄时各用鸡大肠杆菌灭活油乳剂苗作颈部皮下注射,剂量依次为2头份/只、3头份/只、4头份/只.免疫Ⅱ组于第3周龄时作颈部皮下注射,剂量为2头份/只.对照组及各免疫组每周采血一次,按常规作血清蛋白电泳分析.结果,樱桃谷雏鸭血清蛋白经电泳后可分离出6条蛋白区带.免疫Ⅰ组、Ⅱ组鸭经首免后1周,γ球蛋白升高,与对照组比较,P<0.01,差异高度显著.免疫Ⅰ组经第二、三次加强免疫后第1周、第2周,与对熙组及免疫Ⅱ组比较,β和γ球蛋白均升高,P<0.01或P<0.05,差异高度显著或显著.对照组鸭在第3周龄后,血清蛋白各组分含量保持相对稳定.     

大肠杆菌K12碱性磷酸酶基因的克隆表达

大肠杆菌碱性磷酸酶是同二聚体金属酶，被phoA基因编码．采用PCR方法从大肠杆菌K12中扩增到碱性磷酸酶基因（phoA）．用限制性内切酶BamHI和HindⅢ将片段插入克隆载体pETBlue-2．该基因被重组、转化后在大肠杆菌中经IPTG诱导表达，而后进行SDS-PAGE检测及紫外吸收分析测OD410．克隆得到了phoA基因并实现了蛋白表达，碱性磷酸酶的活性提高了18，3倍，为进行组织化学、免疫印迹、突变分析等工作打下了坚实的基础．     

pH对L-天冬酰胺酶发酵的影响及其控制

pH对大肠杆菌L-天冬酰胺酶的产生有很大的影响.通过对不同缓冲体系试验和对摇瓶发酵过程pH变化的分析,了解摇瓶发酵过程中pH对L-天冬酰胺酶合成的影响.采用流加磷酸自控L-天冬酰胺酶发酵过程的pH,可延长发酵周期,有效地防止菌体的过早自溶,大大促进L-天冬酰胺酶的合成,较分批发酵提高产酶83%,达到110 u/mL.发酵动力学特性分析表明,该发酵方式L-天冬酰胺酶的合成与菌体生长不相关,控制比生长速率μ为0.15～0.30 h-1,均有利于L-天冬酰胺酶的合成,可使比产酶速率的最大值Qpmax达到3 922 u/(g h).     

天然牛黄及牛活体胆汁中菌群的研究

本文所研究的问题,在国内外尚未见有报道。该研究证明,在天然牛黄及胆汁中,均存在埃希氏大肠杆菌;在产牛黄的同一个胆囊里,可有数株埃希氏大肠杆菌同时存在,在正常牛活体胆汁中,埃希氏大肠杆菌的总检出率为45.9％,并发现在一个胆囊里,数株埃希氏大肠杆菌转化结合胆红素为非结合胆红素的能力差异很大。在产天然牛黄的胆囊里均存在转化率高的埃希氏大肠杆菌,但在正常牛胆囊里的埃希氏大肠杆菌的转化率则较低。因此,植黄用的菌种,应选用天然牛黄及其胆汁中分离的转化率高的埃希氏大肠杆菌。     

大肠杆菌O96 O-抗原基因簇的破译和特异基因的鉴定

大肠杆菌O96血清型的大肠杆菌近年来频繁地出现于分离到的致病菌株中,在发展中国家和发达国家均有发现,有造成爆发性流行的可能．本文利用鸟枪法对大肠杆菌O960～抗原基因族进行测序,序列全长9415bp,用生物信息学的方法进行序列分析,共发现7个基因,分别是：吡喃型UDP-半乳糖变位酶基因(glf),O-抗原转运酶基因(wzx),O-抗原聚合酶基因(wzy)和糖基转移酶基因(4个)．本文分析了大肠杆菌O96和K12(016)的O-抗原基因族中吡喃型UDP-半乳糖变位酶基因和O-抗原转运酶基因的进化关系,确定了吡喃型UDP-半乳糖变位酶的基序;用PCR的方法筛选出了2个针对大肠杆菌O96的特异基因,可以用于基因芯片或PCR方法快速检测大肠杆菌O96。     

10种大肠杆菌对47种抗生素敏感性测试的研究

随着抗生素的广泛使用,细菌对药物的耐药性逐渐增强.了解细菌对药物的敏感程度,对微生态制剂的研究及临床用药具有指导作用;本实验结果表明多数菌对苯唑西林、克林霉素、青霉素G等出现不敏感;某些菌对链霉素、头孢拉啶、万古霉素、阿奇霉素等出现敏感性,但某些菌对其则出现耐药或轻度耐药;10种菌对阿米卡星、氨苄西林/舒巴坦等均强的出现极高的敏感性.     

天津海河流域水体及自来水细菌检测及分析

利用平板菌落计数法和多管发酵法检测天津海河流域水体和自来水中的细菌总数、总大肠杆菌群及粪大肠菌数,以期对天津海河流域水体微生物污染状况进行分析。结果表明,在1mL的天津自来水水样中总菌数小于1,没有检测出大肠杆菌和粪大肠菌,符合《生活饮用水卫生标准》(GB5749-2005)的规定。对海河水的检测结果为大肠杆菌平均70 000个/L,超出III类水标准,粪大肠菌平均700个/L,属于II类水标准。粪大肠菌群的存在可认为河水直接或间接的受到了比较近期的人或动物粪便污染,应引起人们的重视。