以光生物素标记DNA的点杂交比色法迅速鉴定类单胞菌的研究

应用光生物素标记参考菌株DNA比色法以DNA-DNA点杂交对类单胞菌属的分离菌株及参考菌株进行遗传学鉴定。在强日光灯下,光生物素标记DNA15min。以少量菌体法提取被测菌株的DNA,并将此DNA点种在硝酸纤维膜上;碱性磷酸酶偶联链霉抗生物素基物显色法DNA-DNA点杂交,颜色图形分析仪测定点杂交颜色强度。该方法鉴定结果与数值分类法的结果和复性率定量测定DNA-DNA同源性的结果基本相符。光生物素标记DNA比色法DNA-DNA点杂交鉴定类单胞菌是一种快速而简便的方法。     

光生物素标记DNA荧光法微孔板DNA杂交测定类单胞菌DNA-DNA相关性的研究

应用光生物素标记DNA荧光法微孔板DNA杂交测定类单胞菌的分离菌株和参考菌株DNA-DNA相关性.热变性DNA固化在96孔微孔板,光生物素标记DNA与固化DNA杂交,测定酶链霉抗生物素偶联β-D-半乳糖苷酶(Strept-avidin-conjugated β-D-galctosidase)作用于敏感荧光底物4-甲基荧光素-β-D-半乳糖苷(4-methylumbelliferyl-β-D-galactoside).在波长365nm激发450nm发射,荧光分析仪测定杂交的荧光强度.根据荧光强度,计算分离菌株和参考菌株DNA-DNA相关性.试验结果表明:光生物素标记ONA荧光法微孔板DNA杂交是更敏感的方法,与光生物标记DNA硝酸纤维膜比色法点杂交、DNA动力学测定DNA同源性,数值分类法的结果基本相符.     

南极寡营养细菌ANT52的脂多糖对梭子蟹非特异性免疫功能的影响

文章采用改良酚水法提取南极寡营养细菌(Alteromonas stellipolaris)ANT52的脂多糖,得率可达6.73%,据SDS-PAGE分析结果判断细菌ANT52的脂多糖为光滑型脂多糖。以南极寡营养细菌ANT52脂多糖提取物免疫注射梭子蟹,分别在免疫接种后的第3、6、9、12天检测梭子蟹血清的溶菌酶活力、超氧化物歧化酶活力及血淋巴细胞的吞噬活性等非特异性免疫指标,结果表明:南极寡营养细菌ANT52提取的脂多糖能显著提高梭子蟹血清中的溶菌酶活力、超氧化物歧化酶活力、血细胞吞噬活性(P<0.05),且各种酶活力及血细胞吞噬活性出现峰值的时间不同,溶菌酶出现峰值时间早于超氧化物歧化酶。