人风疹病毒IgG抗体时间分辨免疫荧光法的建立

目的：建立人风疹病毒（Rubella virus;RV）IgG抗体时间分辨免疫荧光分析（TRFIA）的方法。方法：采用间接两步法建立人风疹病毒IgG抗体的TRFIA分析方法,并对试剂盒的各项指标进行评价。结果：试剂盒的可测范围为5～1601U／ml,灵敏度为0．0921U／ml,批内、批间的变异系数（CV）分别为7．8％和105％;130份血样用本方法与进口的同类试剂盒同时检测,其相关系数为0．926。结论：本试剂盒的各项指标均达到临床检测的要求。     

风疹病毒E1抗原基因片段的拼接及原核表达

应用基因克隆技术,对风疹病毒E1抗原基因片段进行拼接及克隆表达．根据软件GOLDKEY预测E1抗原的主要抗原决定簇位点E1(243～286aa),再设计4条近60个碱基长引物,利用PCR仪延伸合成目的基因,酶切并构建重组表达载体,酶切与测序鉴定,再转化表达菌株BL21(pLYS),IPTG诱导表达,行SDS-PAGE检测到目的基因表达成功．结果实现了用基因克隆技术将含E1(243～286)片段的pETKDO载体向大肠杆菌的转化,IPTG诱导2h,获得的表达量高。