转甜菜碱醛脱氢酶(BADH)基因水稻第三叶气孔特征的观察

用扫描电镜对转BADH基因水稻52—7及其受体亲本中8第三叶表面气孔器进行了比较观察。发现了52—7气孔器形态、气孔器乳突及某些气孔性状发育不全的现象；叶缘、叶腹面和叶基部气孔器的乳突及气孔器蜡质的发育分别早于和快于叶中、叶背面和其它部位；52—7不同部位气孔器乳突数的多少、气孔器乳突的位置及气孔器蜡质的发育情况与BADH基因的转入无关，而叶缘和叶中气孔器乳突数的差异及明显的边缘效应优势与BADH基因的转入有关。     

甲醛对人红细胞的影响

生产、科研、生活中,有大量人群长期接触甲醛。甲醛可引起肝脏病变,致癌、致突变,已日益为人们所关注。本文采用人红细胞为材料,研究甲醛的毒害作用。人红细胞悬液,经0.1～1.0×10~(-6)mol/l甲醛处理后,通过生化分析,实验结果表明,在本实试条件下甲醛增强红细胞溶血作用,抑制乙酰胆碱酯酶活力和引起可滴定巯基含量降低。同时使磷酸甘油醛脱氢酶、乳酸脱氢酶活力提高和促进细胞内Ca~(3+)的泄漏。     

红树植物白骨壤甜菜碱醛脱氢酶基因的克隆与功能研究

甜菜碱在植物体内以胆碱为底物,经两步酶催化反应合成,其中催化第二步反应的是甜菜碱醛脱氢酶(Betaine Aldehyde Dehydrogenase, BADH).为研究甜菜碱醛脱氢酶基因在酵母中是否具有生物学功能,通过PCR-RACE技术从红树植物白骨壤(Avicennia marina)中分离得到BADH基因,将其转入酿酒酵母AH109中.通过对重组酵母生长曲线的测定,发现重组酵母对NaCl的耐受度由转化前的9%提高到14%,表明白骨壤BADH基因在酵母中能得到有效表达出具生物学活性的蛋白质.     

大肠杆菌甜菜碱醛脱氢酶基因的测序及对烟草的转化

对利用聚合酶链式反应所克隆的大肠杆菌ｂｅｔＢ基因进行了序列测定,结果证实获得了该基因的克隆ｐＸＹ０１,ｐＸＹ０５以及亚克隆ｐＸＹ１１。将该基因置于ＣａＭＶ３５Ｓ启动子调控下,导入根癌农杆菌ＬＢＡ４４０４中,叶盘法转化烟草,在含卡那霉素的选择培养基上筛选抗性芽,并进一步诱导小植株的再生。利用ＰＣＲ技术检测基因整合到烟草基因组中。     

不同类型禾谷类作物幼芽中甜菜碱醛脱氢酶蛋白含量差异

用Western blot方法分析了甜菜碱生物合成酶之一甜菜碱醛脱氢酶（BADH）在同基因型禾谷类作物——小麦、玉米、水稻、高粱和大麦幼芽中蛋白含量的变化,结果表明BADH在禾谷类作物种子萌发早期（幼芽）中普遍存在,并有较高的含量．不同类型的作物BADH蛋白含量不同,在同一类型作物的不同品种间也表现出明显的差异．     

从兔骨骼肌综合提取ALD等五种酶的研究

采用一种组合５’－ＡＭＰ亲和层析、离子交换层析、分子筛层析以及重结晶的方法，从经硫酸铵沉淀初步分离的四个兔骨骼肌酶组分中逐步分离和纯化出醛缩酶等五种医用酶。本方法提取的五种酶均具有高比活和高纯度。本方法提取成本低，操作简便，酶活回收率高，因此具有应用价值     

毛冠鹿与3种麂属动物的GAPDH基因序列的比较分析

麂亚科（Muntiacinae）动物包括麂属（Muntiacus）和毛冠鹿属（Elaphodus），分布于东南亚、中国及印度，动物形态相似，但具有令人瞩目的细胞遗传学特性．本文以赤麂（Muntiacus muntjak）、黑麂（Muntiacus crinifrons）、小麂（Muntiacus reevesi）和毛冠鹿（Elaphodus cephalophus）4种麂亚科动物为材料，以3-磷酸甘油醛脱氧酶（GAPDH，管家基因）为靶基因，对毛冠鹿在麂亚科中分类地位进行分子鉴定．提取这4种动物的基因组DNA，根据人的GAPDH基因设计引物，进行PCR扩增．获得了约为300bp的扩增产物．将纯化后的扩增产物克隆到质粒pMD18＋TVector中，转化DH-5a菌，挑选阳性克隆。用M13-47／RV—M通用引物进行测序．测序的结果经clustal软件进行了同源性比较．结果显示：麂属动物种问GAPDH基因间的DNA差异在2．52％～4．37％之间，毛冠鹿与麂属3种动物的差异在1．79％-2．87％之间．这些变异以碱基的转换为主．本文结果支持毛冠鹿为独立属1种的分类观念．     

肺炎克雷伯氏菌3-羟基丙酸合成关键酶基因过表达与NAD~+再生的耦合

在肺炎克雷伯氏菌(Klebsiella pneumoniae)中超表达内源甘油脱水酶基因dhaB和醛脱氢酶基因puuC,同时引入酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)的3-磷酸甘油脱氢酶基因GPD1,得到耦合3-羟基丙酸(3-HP)合成与NAD+再生的重组菌K.p(pET-pk-dhaB-puuC-GPD1)。微氧摇瓶发酵结果显示在15h时3-HP产量达到1.45g/L,是携带空载体菌的2.39倍。分析是遗传扰动影响了底物甘油的代谢流量分配,从而提高了3-羟基丙酸的产量。     

恶臭假单胞菌ND6菌株中与萘降解相关的新型水杨醛脱氢酶NahV

在大肠杆菌中表达了Pseudomonas putida ND6菌株中与萘降解有关的水杨醛脱氢酶同工酶 NahV, 并对其酶学性质进行了研究. 结果表明, NahV与ND6菌株中经典的水杨醛脱氢酶NahF的氨基酸序列同源性较低, 是一种新的水杨醛脱氢酶. 对NahV和NahF的酶动力学研究结果表明, NahF具有更高的催化效率, 而NahV对水杨醛和NAD⁺的亲和力更强. ND6菌株的NahV和NahF都有较宽的底物范围, 可以催化水杨醛、5-氯水杨醛、甲醛、间硝基苯甲醛、邻硝基苯甲醛、邻甲氧基苯甲醛、戊二醛、辛醛和乙二醛的脱氢反应, 但对不同底物的催化效率不同. Fe²⁺, Cu²⁺和Zn²⁺对NahV有激活作用, 而NahF只能被Fe²⁺激活. NahF具有更好的热稳定性, 在50℃保温30 min仍有72.8%的酶活力, 而NahV则丧失了88.8%的酶活力. DNA斑点杂交结果表明, 类nahF基因在本研究检测的两种来源的萘降解细菌中都存在, 而类nahV基因只存在于一种来源的萘降解细菌中.     

甜菜碱的生物合成及其基因工程的研究进展

综述了甜菜碱的合成过程和催化酶类的相关特性。并对催化甜菜碱合成的胆碱脱氢酶(CDH)、胆碱单加氧酶(CMO)、甜菜碱醛脱氢酶(BADH)、胆碱氧化酶(COD)基因工程方面的研究进展进行了综述．