不同试剂盒提取质粒中内毒素水平的比较

目的比较几种不同质粒提取试剂盒提取质粒中内毒素水平。方法选用6种市售商业化试剂盒:QIAGEN质粒小提试剂盒Plasmid Mini Kit(12123),QIAGNE无内毒素质粒大提试剂盒EndoFree PlasmidMaxi Kit(12362),康为世纪高纯质粒中提试剂盒(CW0502),A厂家无内毒素质粒中提试剂盒,B厂家无内毒素质粒小提试剂盒,C厂家无内毒素质粒小提试剂盒(BSC01S2D)。分别提取质粒DNA,应用鲎试剂显色基质法和凝胶法检测所提质粒中内毒素水平。结果6种试剂盒提取质粒得率、A260/A280及A260/A230值均较好,但内毒素水平各不相同,其中各厂家标明无内毒素试剂盒提取质粒中内毒素水平相对较低,QIAGEN无内毒素质料大提试剂盒提取的质粒中内毒素小于0. 125 EU/μg。结论6种质粒提取试剂盒使用时应根据实际情况进行选择。     

非离子表面活性剂存在下过氧化氢对木素过氧化物酶的抑制动力学研究

研究表面活性剂水溶液体系中木素模型化合物的酶法降解机制具有重要意义．本文用动力光度技术研究了非离子表面活性剂TritonX-100(TNX)存在下过氧化氢对木素过氧化物酶(LiP)的抑制作用．结果表明，该抑制作用属可逆竞争抑制．TNX的存在使H2O2的抑制作用加强，抑制常数Ki值下降．Ki值随TNX浓度(远低于、接近于和远大于其临界胶束浓度)变化很小这一结果表明起主导作用的是TNX单体，上述结果应该是有限数目的表面活性剂单体对酶蛋白分子的修饰所致．     

麻雀端脑听区的纤维联系

在氨基甲酸乙酯麻醉的麻雀上,用辣根过氧化物酶(HRP)顺、逆行追踪方法研究端脑听区(L)的纤维联系,结果发现:端脑听区(L)的纤维投射到端脑上纹状体腹侧尾核(HVC),并且接受丘脑卵园核(OV)的纤维投射,这就提示:端脑听区(L)除接受听觉的传导路中第四级中继站——丘脑卵园核(OV)的纤维投射外,还发现纤维投射到发声控制的高位中枢——端脑上纹状体腹侧尾核(HVC).也就是说端脑听区(L)既是听觉的高位中枢,也与发声学习关系密切.     

食蟹猴(Macaca fascicularis) B病毒相关抗体的初步探讨

以人单纯疱疹病毒为抗原，用玻片免疫酶法（ＥＩＡ）检测来自广西中越边境地区及广西灵长类研究中心的食蟹猴Ｂ病毒相关抗体。发现食蟹猴Ｂ病毒相关抗体的阳性率随年龄增长而增加。野外捕获混养级阳性率为８３．４％；野外捕获组阳性率为４９．８％；自繁分笼群养组阳性率为１４．６％。三组中，不同性别之间相关抗体阳性率没有显著性差异（Ｐ〉０．０５），组间Ｂ病毒相关抗体阳性率的差异极显著（Ｐ〈０．０５）。     

“新双酶法”发酵生产技术

中美合资无锡星达生物工程公司1996年研制成功“新双酶法”发酵生产技术并被列为国家科技重点推广项目。     

广西地区恒河猴(Rhesus Monkey)B病毒相关抗体的检查研究

采用玻片免疫酶法(IEA)和酶联免疫吸附试验法(ELISA),检查了来自广西不同来源恒河猴B病毒的相关抗体。结果表明:广西野生恒河猴受B病毒的感染较为普遍,来自龙虎山及扶绥保护区的猴,B病毒相关抗体阳性率分别是79.7%和75.3%。来自穿洞河及布柳河保护区的猴,B病毒相关抗体阳性率分别是26.1%和28.9%。大新保护区猴阳性率为57.1%。在不同组猴中,小群关养组猴相关抗体阳性率最高,野生猴次之,自繁猴最低。三组间,猴B病毒相关抗体阳性率的差异极显著(P<0.05),经ELISA检查确定为阴性的猴,用IEA检查出7.5%(15/200)的猴被判定为阳性猴。     

一种快速检测冰冻红细胞甘油残留量的方法

评价使用甘油三酯试剂盒测定洗涤后冰冻红细胞上清液中甘油残留量的快速性、准确性及灵敏度。笔者针对甘油三酯试剂盒进行了线形观察、回收实验、干扰实验及测定随机抽取8袋复温洗涤后冰冻红细胞上清。实验结果表明,甘油三酯试剂盒具有快速、准确、灵敏度高等优点,减少了人为误差,测定全过程仅需要15min,适用于血库或血站常规开展冰冻红细胞上清甘油含量测定,确保冰冻红细胞的质量,而且试剂盒在（2—8）℃避光保存,有效期为18个月。     

重组枯草芽孢杆菌谷氨酰胺合成酶蛋白在改良M9培养基中的诱导表达

以重组枯草芽孢杆菌谷氨酰胺合成酶(L-谷氨酸:氨连接酶,Glutamine Synthetase, GS EC 6.3.1.2)蛋白表达宿主菌株BL21(DE3) (pET3C/谷氨酰胺合成酶)作为研究对象,借助SDS PAGE分析方法,对于用乳糖诱导由T7lac启动子控制的重组目的产物蛋白的各种基本参数进行了初步的研究.研究了最佳本底培养基、最佳碳源及其最佳添加比例、碳源与诱导物的最适组合,并探索了适用于改良型培养基的诱导参数.实验结果表明,对于重组目的产物蛋白,改良型M9培养基完全可以替代LB培养基;以甘油为碳源,可以避免葡萄糖对T7lac启动子的屏蔽作用.以乳糖为诱导物,目的蛋白的表达量、可溶性及酶活与以IPTG为诱导物基本接近.研究结果为酶法合成谷氨酰胺的工业化生产提供了一定的参考.     

胡芦巴半乳甘露聚糖酶法改性的工艺条件

采用正交实验法优选纤维素酶降解胡芦巴半乳甘露聚糖的最佳工艺条件,以黏均分子质量和还原糖得率为指标,考察了酶解温度、酶解时间、酶用量及pH对降解效果的影响.结果表明,纤维素酶降解最佳工艺条件为:酶用量1500U/g,酶解温度50℃,pH 5.0,酶解时间150min,影响降解工艺的主次因素顺序为:酶解温度>酶用量>酶解时间＞pH.所得产物的黏均相对分子质量1.2×105,还原糖得率5.1%.