一种检测环氧合酶的新方法——半定量RT-PCR法

作者研究的目的是建立一种较为灵敏、简便的方法检测环氧合酶COX 2 .先设计了一对针对COX 2的特异性引物 ,建立了以半定量逆转录 聚合酶链反应 (Semi QuantitativeReverseTranscrip tionPCR ,SQRT PCR)方法检测COX 2的mRNA ,用该方法检测 7种结肠癌细胞和非甾体类抗炎药吲哚美辛 ,作用于其中一种细胞后的COX 2mRNA .实验结果显示 ,半定量RT PCR法可以灵敏、快速地反映COX 2mRNA表达水平的变化 ,为寻找新的COX 2选择性抑制剂和分析NSAIDs抗炎作用机理提供了一种新的方法 .     

多聚酶链反应（PCR）的应用：有机体和群体生物学

在过去的15年内,重组DNA技术的发展使得人们能在分子水平上对特殊的基因作详细地研究。生物科学的许多领域如遗传学、分子生物学、细胞生物学和发育生物学所获得的成果都是巨大的,这些进展的取得是对一定量的物种主要是人、鼠、果蝇、酵母和大肠杆菌的基因结构作充分分析的结果。     

α—珠蛋白基因的PCR检测

用多对引物的复合ＰＣＲ技术，分别扩增α－珠蛋白基因族中α１和α２基因片段；参照β－珠蛋白基因ＰＣＲ扩增产物量，判断α１和α２基因是否正常，是否为缺失的纯合子或杂合子，对α－地中海贫血症先征者家系基因型进行ＰＣＲ分型诊断。     

检验唐氏综合症的法医学方法研究

利用荧光标记的PCR法，对唐氏综合症的检验进行研究．采用法医学检验常用试剂盒AmpFe STR^TM Profiler Plus^TM对唐氏综合症病例进行PCR扩增，扩增产物用ABIPRISMT”310型DNA全自动测序仪分型判断．结果表明，该检验方法具有简便、快速、直接、准确的特点，检验效果非常好，而且可用于产前诊断．该方法用于检验唐氏综合症是一种理想的方法．     

动物疾病快速诊断—未来属于聚合酶链反应

传统的病原微生物鉴定方法通常很费时,昂贵并要求有相当技术水平的人操作。近十年来,为了诊断疾病及法医鉴定的需要,发展了核酸检测法。这种方法通过限制性内切酶消化及电泳分离可制出微克量的高质量DNA,而单一基因复制的顺序十分困难,全过程需要一周左右。聚合酶链反应(Polymerase Chain Reaction)的出现解决了试管内测定极小量的核酸     

FD-TRT耐热逆转录酶的特性分析

从嗜热细菌ＦＤ３００９中克隆并分离纯化得到的耐热逆转录酶（ＦＤ－ＴＲＴ）,逆转录反应在６５℃高温下进行,可克服常温逆转录酶的许多缺点,以酵母核糖体ｒＲＮＡ为模板,以与２５５和１８Ｓ ｒＲＮＡ匹配的寡聚脱氧核苷酸为引物,探明了ＦＤ－ＴＲＴ的最适反应条件： ２５ｍｍｏｌ／Ｌ Ｔｒｉｓ－ＨＣｌ（ｐＨ ８．５,２５℃）,２５ ｍｍｏｌ／Ｌ（ＮＨ４）２ＳＯ４,２ ｍｍｏｌ／Ｌ ＭｎＣｌ２,１００ μｇ／ｍｌ明胶．５ ｕｎｉｔ ＲＮａｓｉｎ,２５０ ｍｍｏｌ／Ｌ ４种 ｄＮＴＰ, １μＣｉ３ Ｈ－ｄＣＴＰ, １２ｕｇ ＲＮＡ,２５ ｐｍｏｌ引物,并在此条件下测得 ＦＤ－ＴＲＴ和 Ｔａｑ ＤＮＡ 聚合酶逆转录活力与聚合酶活力的相对比值分别为０．０５６,０．００４５．     

痰和咽拭子PCR及血清学联合检测肺炎衣原体急性呼吸道感染

了解成人呼吸道感染患者急性肺炎衣原体感染的发病情况。呼吸道感染患者１１０例,同时采集痰和咽拭子标本,应用聚合酶链式反应（ＰＣＲ）检测肺炎衣原体ＤＮＡ及采静脉血检测肺炎衣原体抗体。本组患者１７例（１６％）有肺炎衣原体近期感染的急性抗体,１２例（１１％）痰和（或）咽拭子肺炎衣原体ＰＣＲ检测阳性,联合应用两种方法的阳性率为２３％（２５／１１０例）。肺炎衣原体急性感染以哮喘急性发作、肺炎、ＣＯＰＤ急性加重和急性支气管炎患者多见（分别为５７％、３５％、２６％和２５％）,其临床表现无特征性。本组成人呼吸道感染患者肺炎衣原体急性感染的发病率较高,提示肺炎衣原体是呼吸道感染的重要致病原。     

人肾癌TIL细胞抗原受体Vβ基因的优势表达

定量聚合酶链反应(qPCR)技术的应用有力地推动了对T细胞抗原受体谱(TCR reper- toire)的研究,已能够以此分析TCR α和β链编码基因V区和J区片段限制性取用(Re-stricted usage)的格局,确定抗原驱动下发生寡克隆扩增的T细胞及其特点,有可能为肿瘤特异性免疫干预开拓新的前景.有关尝试已在人体黑色素瘤、肝细胞癌中获得结果.由于T细胞识别的是抗原肽和MHC分子构成的复合物,以往的研究往往忽略了肿瘤浸润淋巴细胞(TIL)供者的HLA背景,致使结果不一致.本研究采用qPCR技术分析人体肾细胞癌取用TCR Vβ格局的同时,测定肿瘤细胞表面HLA Ⅰ类抗原表达状况,并作HLA分型.现报告对3例患者的分析结果.     

在食品检验中应用聚合酶链反应技术(PCR)

聚合酶链反应(PCR)技术,现已在医学工程、疾病诊断、遗传工程、考古学及法医学等领域得到广泛应用,由于该技术具有灵敏、特异、产量高、速操作简便和容易自动化等突出优点,因此,也被应用于食品检验.本文就PCR技术的原理及在食品卫生检验中的应用作一综述.     

巨细胞病毒在132例新生儿黄疸中的检出情况

为探讨新生儿黄疸患儿与巨细胞病毒（CMV）感染的关系，应用聚合酶链反应（PCR）技术，对132例新生儿黄疸患儿血清进行HCMVDNA病毒检测，结果阳性14例，阳性率为10．6％．