地衣芽孢杆菌A.4041耐高温α-淀粉酶色氨酸残基和巯基的化学修饰

用N-溴代琥珀酰亚胺（NBS）和N-乙基丁二酰亚胺（NEM）分别对A．4041α-淀粉酶的主要组分α－Ⅲ的色氨酸（TrP）残基和巯基进行修饰．结果表明，50％的Trp残基被NBS修饰，可使酶活力完全丧失；Ca2+和底物可减少修饰酶的失活；加Ca2+或底物后修饰酶的荧光强度较对照修饰酶有显著提高．表明Trp是催化必需基团，并与结合底物和Ca2+有关．用过量NEM修饰巯基，酶活力改变不大，表明巯基不是酶的催化必需基因，并对酶的热稳定性基本无影响．     

色氨酸在 Toyopearl HW-40S 凝胶填料上非理想排阻行为的研究

发现１８种氨基酸特别是色氨酸．在ＴｏｙｏｐｅａｒｌＨＷ－４０Ｓ树脂所填色谱柱上表现出非理想排阻行为的基础上，以色氨酸在该柱上的保留时间为指标，探讨不同流动相改良剂对该凝胶与色氨酸之间的相互作用，阐明这种反常行为是疏水作用，离子交换以及氢键三者综合作用的结果，而疏水作用是最主要的影响因素．实验结果表明，流动相组成对该凝胶色谱行为具有明显的影响，从而有助于确立该凝胶理想的排阻色谱条件，为利用该凝胶所具有的吸附性能分离分析肽类和氨基酸等小分子物质奠定了基础     

荧光猝灭法测定铕

研究了不同条件下Eu^3 与色氨酸的荧光光谱性质，实验发现Eu^3 对色氨酸的自体荧光具有显著的猝灭作用，结果表明，在pH 10．6的三酸缓冲介质中，色氨酸的荧光猝灭程度与Eu^3 浓度呈良好的线性关系，据此建立了荧光猝灭法测定Eu^3 的新方法．该方法用于样品测定，操作简便、重现性好、灵敏度高．     

水稻线粒体tRNATrp的种属特异性氨酰化

为了研究原核生物和真核生物（细胞质）色氨酰tRNA合成酶（TrpRS）对线粒体tRNA^Trp识别的种属特异性,构建了7个水稻线粒体tRNA^Trp三位点（G73,U72,A68）的单点或多点突变的突变体．这些突变基因,经体外转录后分别用枯草杆菌（B．subtilis）和人色氨酰tRNA合成酶（TrpRS）进行氨酰化反应,并测定它们的动力学常数．结果表明,与野生型水稻线粒体tRNA^Trp相比,7个突变体的转录产物被B．subtilis TrpRS氨酰化的活力分别降低了53．33％-99．79％,被人TrpRS氨酰化的活力却分别提高了4～330倍,其中以MPH7（水稻线粒体tRNA^Trp的三碱基（G73,U72和C68）全部突变为人tRNA^Trp的三碱基序列）的氨酰化活力改变最大．实验结果证明,与真核生物和原核生物细胞质tRNATrp的种族特异性类似,水稻线粒体tRNA^Trp的种属特异性元件也主要处于氨基酸接受茎的识别位碱基、第一和第五对碱基对,亦即识别位碱基G73,氨基酸接受茎上的两个碱基对G1／U72和U5／A68．本研究为线粒体tRNA^Trp起源于真细菌的推论提供了实验依据．     

高效液相色谱法同时测定树鼩脑组织中的去甲肾上腺素,多巴胺,5-羟色胺及色氨酸

应用高效液相色谱(HPLC)--荧光检测,在一根带有预柱的LKB Superpac ODSC_(18)钢柱上,使用离子对系统做为洗脱液,对一组正常活动规律的树鼩脑组织液中的去甲肾上腺素(NE)、多巴胺(DA)、5-羟色胺(5-HT)及色氨酸(TRP)进行测定。荧光检测的波长为激发波长280nm,发射波长360nm得到各物质最小检测限量为:40ng NE和80ngDA(信噪比3:1)以及10ng5-HT和15ng TRP(信噪比4:1)。此方法具有实验操作简单、方便、快速、灵敏度较高、样品易于处理等特点。     

竹红菌乙素对肌质网Ca~(2+)-ATP酶蛋白色氨酸荧光猝灭研究

肌质网Ca~(2+)-ATP酶是一种重要的膜蛋白酶,它在肌细胞的收缩舒张功能中起重要作用,因而其动力学行为被广泛地研究,但是有关结构与功能之间关系的直接实验数据仍然不足.为了从分子水平上阐明Ca~(2+)-ATP酶催化原理,1993年Ferrira用荧光猝灭方法首先观察了肌质网Ca~(2+)-ATP酶在加入Ca~(2+)前后分子构象的变化.由于作者使用的猝灭剂是分子氧,除了在测定工作中使用不方便之外,灵敏度也不够高.为此本文用竹红菌乙素作为肌质网Ca~(2+)-ATP酶荧光猝灭剂,分别测定了该酶在有钙或无钙的条件下荧光猝灭的情况,结果证明竹红菌乙素可以在稳态和瞬态的条件下观察到体系中有钙或无钙时的荧光猝灭常数变化的情况(即不同的K_q值);进而说明了竹红菌乙素作为肌质网蛋白荧光猝灭剂可以得到比氧更多的信息和许多其他优点.     

锌铜色氨酸配合物的伏安特性研究

作为一切生命活动的基础———蛋白质，其基本组成单位是氨基酸，因此，氨基酸对人体起着不可估量的作用．人体内微量元素如铜、铅、锌、钴、镍、钼、镁等为亲生物元素，主要通过与氨基酸的配合反应发挥其生物必需营养元素的作用．因此，建立快速、简便、灵敏的分析方法，对氨基酸与微量元素生成的配合物进行研究，对生命科学有十分重要的意义．伏安分析法是一种简便而又灵敏的分析方法［１］，利用伏安分析法对氨基酸及其金属配合物的研究不断被报道．Ｊｏｓｉｎｏ［２］研究了组氨酸和铜生成的配合物的伏安行为，认为是溶液中先进行氨基酸…     

鼠伤寒沙门工菌JL65色氨酸合酶trpB基因的克隆,测序和相关特性的研究

用ＰＣＲ方法从鼠伤寒沙门氏菌ＪＬ６５染色体ＤＮＡ中扩增了ｔｒｐＢ基因片段，克隆到ｐＢｌｕｅｓｃｒｉｐｔⅡＳＫ质粒上，并用双脱氧末端终止法测定了其核苷酸序列。ＪＬ６５ｔｒｐＢ基因和ＷＴＳ．ｔｙｐｈｉｍｕｒｉｕｍ ｔｒｐＢ基因作比较后，发现仅有３处的核苷酸差异，其中ｔｒｐＢ基因的１００位由Ｃ突变由Ａ，１１１位由Ｇ突变为Ａ，１０３０位由Ｇ突变为Ａ，导致３４位氨基酸残基Ａｒｇ变为Ｓｅｒ，３４４位的Ｇｌｙ变     

用NMR法研究色氨酸化学振荡反应的活性中心

利用核磁共振波谱仪研究了色氨酸的化学振荡反应。由ＮＭＲ波谱得知，振荡反应中存在着结合Ｂｒ２的活性基团，这些活性基团构成了振荡反应的活性中心，它们控制着振荡反 能否进行以及振荡寿命。