小鼠初级精母细胞带下受精的研究

众所周知,只有精子才能主动穿透卵子,使卵子受精,而变态前的睾丸生精细胞不能主动地使卵子受精。显微受精技术的发展使得变态前的睾丸生精细胞参与受精成为可能。1993年,Ogura首次将仓鼠球形精子细胞核注入成熟卵母细胞中,发现精核可以发育形成具有DNA合成活性的雄原核,并最终能与卵母细胞雌原核接合,为了减轻由于注射对卵母细胞的     

化学聚集电融合法在新型酵母构建中的应用

在细胞融合过程中化学聚集电融合法,即用PEG作为聚合剂与电融合法连用,取得明显的效果。其条件是:电压11kV;脉冲宽度5μm;脉冲个数3;脉冲时间59s;温度4℃;PEG浓度35％;处理时间30min;处理温度30℃及pH6.从细胞体积,DNA含量,淀粉糖化能力及葡萄糖发酵能力等方面说明,所获得的新型酵母菌株是两亲本的融合株。     

化学聚集电融合法在新型酵母构建中的应用

在细胞融俣过程中化学聚集电融合法，即用ＰＥＧ作为聚合剂与电融合法连用，取得明显的效果。其条件是：电压１１ｋＶ；脉冲宽度５μ脉冲个数３；脉冲时间５９ｓ；温度４℃，ＰＥＧ浓度３５％；自理时间３０ｍｉｎ；处理温度３０℃及ｐＨ６．从细胞体系、ＤＮＡ含量，淀粉糖化能力及区区糖发酵能力等方面说明，所获得的新型酵母是两亲本的融合株。     

单克隆抗体制备的一种特异电融合方法研究

常规制备单克隆抗体(McAb),一般采用的都是非特异融合方法,这就导致(1)分泌特异性抗体的杂交瘤阳性率不高、筛选工作量大;(2)不易得到高亲和力的McAb。近年来,Lo等和Wojchowski等发展了生物素-抗生物素-抗体-抗原介导的特异电融合,克服了上述缺点。然而,该方法较繁琐,不宜推广应用。我们用双功能连接剂将抗原直接挂到骨髓瘤细     

克氏固氮菌与枯草芽孢杆菌的原生质体电融合

为了提高联合固氮菌的抗逆性,采用电融合技术,在小麦根际联合固氮菌（Ｋｌｅｂｓｉｅｌａｏｘｙｔｏｃａ）与抗逆性强的枯草芽孢杆菌（Ｂａｃｉｌｕｓｓｕｂｔｉｌｉｓ）之间实行了原生质体融合,并从再生的融合子中筛选到多株具有特定性状的后代菌株。经形态观察、革兰氏染色、抗生素抗性、耐热性、抗菌活性、固氮活性以及淀粉酶试验等多项指标测定,数株融合子表现出双亲的耐热、抑菌、固氮等优良性状,具有潜在的应用价值。     

克隆牛过程中电融合条件对附植前胚胎发育的影响

实验比较了克隆牛过程中电融合条件的改善对附植前胚胎发育的影响. 电融合强度为140 V/mm,10 μs/次时的效率要较100 V/mm,20 μs/次和180 V/mm,10 μs/次时高,可以降低融合后重构胚死亡率,提高克隆牛囊胚发育率. 施加直流电脉冲前先给予5 V交流电场预处理数秒钟,然后在电极之间通以两个直流脉冲(140 V/mm, 10 μs/次,间隔0.1 s)与不用交流电预处理对融合率和重构胚的发育率无显著差异. 另外实验比较了甘露醇和山梨醇两种融合液对融合及重构胚发育的影响,结果表明囊胚发育率差异不显著,但山梨醇较甘露醇融合液更容易操作. 实验生出的4头克隆牛存活至今.     

低强度快速电磁脉冲导致细胞电穿孔的研究

采用宽频带横电磁传输室,在实验中发现低强度快速电磁脉冲作用可以导致细胞产生电穿孔和电融合形象,并初步分析了机理和应用前景。     

米曲霉与黑曲霉原生质体种间电融合杂交育种

研究了培养基、菌龄、缓冲系统、渗稳剂、酶系统等因素对米曲霉和黑曲霉原生质体制备和再生的影响，探讨了电融合的最佳条件。通过种间原生质体电融合，得到了稳定的重组子。测定了融合子的生长速度、蛋白酶活性和酯酶同工酶酶谱，与亲本进行比较，得到两株生长较快、蛋白质酶活性较高的融合菌株，拮抗实验表明，他们是不同于亲本菌的新菌种。     

小鼠2—细胞期胚胎细胞电融合的研究

为了探索核移植克隆动物技术中的细胞融合参数，进行了小鼠２－细胞期胚细胞的电融合试验。直流电场强度为２ｋＶ／ｃｍ，脉冲过程４０μｓ时，效果较好，可以获得７０．５％的融合率和６４．５％的发育率，进一步提高电场强度，裂解死亡率也明显提高；采用非电解质溶液作为融合液。