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重组人巨细胞病毒(HCMV)嵌合肽在毕赤酵母中的表达 总被引:2,自引:1,他引:2
目的:在巴期德毕赤酵母中表达人巨细胞病毒gp52C末端和pp150C末端串联片段的嵌合肽,方法:用SacI和BglⅡ分别酶切CMVp-pPIC9K重组质粒,电打孔法导入毕赤酵母GS115后,在缺组氨酸的MD板上筛选出转化子,然后根据甲醇利用快速型(Mut^ )和甲醇利用缓慢型(Mut^s)菌株的不同生长特点,筛选出Mut^ 和Mut^s型转化子,用PCR法进一步鉴定阳性克隆,分别用甲醇诱导Mut^ 和Mut^s型转化子表达目的蛋白4d,取培养产物冻干浓缩,进行SDS-PAGE和Western blotting,筛选出能特异表达目的的蛋白的菌株,分析蛋白的含量及纯度。结果:重组人巨细胞病毒可在甲醇利用快速型毕赤酵母中有效表达,其表达量约占培养上清分泌蛋白的76.5%,结论:重组人巨细胞病毒(HCMV)嵌合肽可在真核细胞毕赤酵母中成功表达。 相似文献
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为探讨新生儿黄疸患儿与巨细胞病毒(CMV)感染的关系,应用聚合酶链反应(PCR)技术,对132例新生儿黄疸患儿血清进行HCMVDNA病毒检测,结果阳性14例,阳性率为10.6%. 相似文献
3.
凝血因子Ⅸ(简称Ⅸ因子)是人体内凝系统的重要成分之一,它的缺乏或功能缺陷可导致血友病B.在血友病B基因治疗的研究中,如何提高Ⅸ因子蛋白的产量是关键问题之一。在以前的研究中,我们比较了SV40早期启动子、小鼠金属硫基因蛋白启动子和Moloney小鼠白血病病毒LTR启动子的作用。为进一步提高Ⅸ因子基因在培养细胞特别是人 相似文献
4.
用聚合酶链反应技术检测110例早孕妇女尿液及其胚胎绒毛的HCMVDNA。结果孕母尿液与胚胎绒毛的HCMVDNA阳性率分别为15.5%和7.3%,宫内感染率为41.2%,孕母尿液与胚胎绒毛的HCMV阳性数密切相关,提示孕母尿路排毒系全身性活动性感染;孕母尿液HCMV阳性与阴性者其胚胎绒毛HCMV阳性数具显著差异,表明孕母尿液阳性者较阴性者处于垂感染胚胎的高危状态,建立采用PCR法普查早孕妇女尿液HC 相似文献
5.
巨生物假说 总被引:1,自引:1,他引:0
董再斐 《云南师范大学学报(自然科学版)》1997,17(2):61-64
本假说也可称之为“地活说”。从“地静说”经“地动说”到“地活说”标志着人类对 宇宙认识的深化。地活说的核心概念是“巨生物”即将宏观天体认作是具有生命基本特征的巨大系统。动用“巨生物”1“巨细胞”这些新概念,可把生命“地球、”“上帝”和“人类”都纳入一个有机的大一统的概念系统中。 相似文献
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目的 建立小鼠巨细胞病毒净化方法,以获得无MCMV感染的小鼠。方法 利用胚胎移植技术,通过使用不同激素、不同发情周期注射激素、受体鼠品系、不同的移植方法、不同时期胚胎移植,以及移植胚胎数量等对比试验,优化了净化条件。利用优化的胚胎移植净化方法,对供体鼠进行了净化。结果 SIGMA生产的激素,在10 IU剂量下超排得到的可用胚胎数量约为17枚/只;在小鼠发情间期超排得到的可用胚胎最多,超排的可用胚胎数约为23枚/只;选取C57雄性小鼠与ICR雌性小鼠交配的子一代作为受体鼠,产仔率达44.5%;输卵管移植较子宫移植效果好,产仔率为40.64%;移植2细胞胚胎的妊娠率为80%,明显优于单细胞和8细胞;受体鼠移植24枚胚胎时,产仔率达到了43.75%。利用优化的小鼠巨细胞病毒胚胎移植净化方法,净化得到了无MCMV感染的小鼠。结论 建立了小鼠巨细胞病毒净化方法,为获得无MCMV感染的小鼠种群提供了可靠的保障。 相似文献
7.
探讨伴有巨细胞的胰腺未分化多形性肉瘤临床病理特点;对1例伴有破骨样巨细胞的胰腺未分化多形性肉瘤进行临床病理分析,并对相关文献进行复习;该肿瘤以在未分化多形性肉瘤中出现破骨细胞样巨细胞为特点,该巨细胞的核大小、形态及着色较为一致,且形态温和,CD68+;未分化多形性肉瘤中单核或多核肉瘤细胞vimentin+、CKP-、EMA-、CKL-、S-100-、αACT-、CEA-、Desmin-、Actin-和HMB45-;发生于胰腺的伴有巨细胞的未分化多形性肉瘤非常罕见,肿瘤标记物在其诊断和鉴别诊断中起重要作用。 相似文献
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目的:探讨应用实时荧光定量PCR法(Real Time Quantitative PCR)检测婴儿尿液中CMV-DNA含量在诊断和动态监测婴儿CMV感染中的意义。方法:应用PE5700全自动PCR扩增分析仪检测80例婴肝患儿和40例对照组患儿尿标本中HCMV-DNA的拷贝数及HCMV-IgM,并对其中48例CMV肝炎患儿在出院半年和一年后进行尿标本HCMV-DNA含量和肝功的动态监测。结果80例患儿尿标本HCMV-DNA阳性率为63.8%(51/80),40例正常对照婴儿尿标本中HCMV-DNA阳性率为10%(4/40),统计学分析表明:婴肝患儿组HCMV-DNA阳性率明显高于对照组,差异有显著性(=31.032,P<0.01);80例患儿血HCMV-IgM阳性率为46.25%(37/80),40例正常对照儿童HCMV-IgM阳性率为2.5%(1/40),统计学分析表明婴肝患儿组血HCMV-IgM阳性率明显高于对照组,差异有显著性(=23.588,P<0.01);通过对出院后的48例CMV感染的婴肝患儿进行一年的随访,发现部分患儿肝功恢复正常后,HCMV不能完全转阴,并有复发的可能性,所以对CMV感染婴肝患儿... 相似文献
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酵母双杂交系统筛选与HCMV pUL23蛋白相互作用的蛋白质 总被引:2,自引:0,他引:2
将UL23基因的ORF序列克隆到酵母表达载体pGBKT7构建诱饵质粒pGBKT7-UL23,用酵母双杂交技术筛选人胚肾cDNA文库中与人巨细胞病毒pUL23相互作用的宿主蛋白分子,再通过回复酵母双杂交再次确认两者之间的相互作用.结果表明:酵母双杂交,回复酵母双杂交试验证明宿主蛋白分子elF3e(eukaryotic trans-lation initiation factor 3,subunit E interacting protein)能够与人巨细胞病毒UL23蛋白相互作用.宿主蛋白分子elF3e能够与人巨细胞病毒UL23蛋白相互作用,这为进一步研究pUL23蛋白在HCMV生活周期中的作用机制提供依据. 相似文献