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基因枪转多基因库安托杨的获得 总被引:3,自引:0,他引:3
通过基因枪共转化方法将枯草杆菌果聚糖蔗糖酶基因(SacB)、透明颤菌血红蛋白基因(vgb)、双价抗蛀干害虫基因(BtCry3A+OC-Ⅰ)、调节基因JERF36及报告基因NPTⅡ等外源基因导入库安托杨, 共获得25株抗性植株. PCR及Southern杂交结果表明, 外源基因已整合到库安托杨基因组中, 其中7株含有上述全部5个外源基因. BtCry3A ELISA实验表明, 上述7株库安托杨BtCry3A基因已得到表达. 且上述转基因植株在滨海盐碱地中生长良好. 相似文献
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早熟禾的组织培养和基因枪介导的基因转化体系的初步建立 总被引:50,自引:0,他引:50
分析了不同质量浓度的2,4-二硝基苯酚对早熟禾愈伤组织诱导和愈伤组织分化成苗的影响,3mg/L和0.1mg/L2,4-D分别是本试验所用早熟禾基因型诱导形成愈伤组织和愈伤组织分化成勒的最适度量浓度。利用基因针GUS基因的pGA470和pAct1-D质粒导入愈伤组织,通过组织染色法检测到Gus基因的瞬时表达。 相似文献
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一种新型基因枪的研究 总被引:1,自引:0,他引:1
为研制一种适应各种场合 ,尤其是在野外操作的基因枪 ,满足将目的基因导入动植物细胞 ,使之稳定表达并遗传 ,实现培育或改良新的优良品种。以压缩弹簧为动力 ,运用撞击发射原理 ,对裹着基因的微粒进行加速 ,使之获得足够的动能 ,去射击靶细胞。弹簧预压力不同 ,微弹的动能随之不同 ,可适应不同细胞的要求。利用所设计的装置 ,在常压下将GUS基因导入番茄叶片细胞 ,经检测 ,得到表达 ;将质粒psv- luc2 0转入小鼠的皮肤、腹部肌肉和肝脏内 ,也得到表达。实验表明 ,该构思是可行的 ,实验装置可以在常压下操作 ,能在各种条件下使用 相似文献
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通过转δ-OAT基因获得抗盐抗旱水稻 总被引:13,自引:0,他引:13
δ-OAT基因编码的鸟氨酸-δ-氨基转移酶是以鸟氨酸为前体合成脯氨酸途径中的关键酶. 采用基因枪法将拟南芥δ-OAT基因导入粳稻品种中作321, 通过PCR及分子杂交分析确定目的基因已插入水稻染色体中并得到超量表达. 抗盐抗旱检测结果表明, 水稻在受到渗透胁迫时会大量积累脯氨酸, 各种条件下转基因水稻积累的脯氨酸是对照的5~15倍; 同等胁迫条件下转基因株系相对生长更快, 苗与根的生物学产量都要高于对照, 最后种子产量也显著高于对照, 如在0.1 mol/L NaCl胁迫下转基因株系相对产量提高了16%~41%, 说明δ-OAT基因超量表达并积累脯氨酸在抗渗透胁迫中有着重要作用, 通过转化δ-OAT基因可以获得抗盐抗旱的基因工程水稻. 相似文献
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丰抗8号小麦悬浮细胞系的建立及遗传转化的初步研究 总被引:1,自引:1,他引:1
董云洲 《应用基础与工程科学学报》1998,(2)
以丰抗8号小麦的幼胚为起始材料,建立了胚性悬浮细胞系.幼胚的取材时期、培养基的成份和选择继代的方法有明显的影响.取开花后12~14d的幼胚、增加无机盐离子和还原态氮的用量、挑选鲜黄致密及松脆类型的愈伤组织能显著地抑制空瘪型、长条型、弯弓形等不良细胞类型出现的频率,促进细胞向圆球型方向分裂生长.通过3个月的选择继代培养,获得了理想的松散状胚性愈伤组织;再经过MS2L和AA液体培养,约2个月后,建立起分散性好、颗粒小、增殖快的小麦悬浮细胞系.以新建立的胚性悬浮系为材料,进行基因枪转化,获得了GUS报告基因的短暂表达,平均短暂表达频率为17.1%.就如何筛选转基因小麦进行了讨论. 相似文献
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将苏云金杆菌家族中的cry1Ac3基因与豇豆胰蛋白酶抑制剂基因(cpti)融合成融合基因,构建cry1Ac3-cpti融合基因植物表达载体,表达Bt-CpTI抗虫融合蛋白.用基因枪转化技术将cry1Ac3-cpti融合基因分别导入玉米优良自交系E28及340的胚性愈伤组织中,轰击后的愈伤组织经筛选剂3次筛选,获得可育的再生植株.经PCR及Southernblot分子检测,证实所获得的再生植株为转基因植株.抗虫性分析结果表明,部分转基因玉米植株对玉米螟虫有较强的抗性.将苏云金杆菌家族中的cry1Ac3基因与豇豆胰蛋白酶抑制剂基因(cpti)融合成融合基因,构建cry1Ac3-cpti融合基因植物表达载体,表达Bt-CpTI抗虫融合蛋白.用基因枪转化技术将cry1Ac3-cpti融合基因分别导入玉米优良自交系E28及340的胚性愈伤组织中,轰击后的愈伤组织经筛选剂3次筛选,获得可育的再生植株.经PCR及Southernblot分子检测,证实所获得的再生植株为转基因植株.抗虫性分析结果表明,部分转基因玉米植株对玉米螟虫有较强的抗性. 相似文献
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谷子胚性悬浮细胞系植株再生体系的建立及转基因技术研究 总被引:2,自引:0,他引:2
研究建立了冀谷11号谷子幼穗的悬浮培养细胞系及植株再生体系.用基因枪技术转化悬浮培养物,在分化培养基上获得了稳定传代的抗性愈伤组织,斑点杂交证明稳定转化愈伤组织的频率为9%~20%. 相似文献
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用基因枪法将水稻碱性几丁质酶(RC24)基因、芷蓿葡聚糖酶(β-Glu)基因、大麦核糖体失活蛋白(B-RIP)基因和潮霉素基因同时导入籼稻品种(七丝软占)中,获得了个潮霉素抗性再生系,Southern blot证明2-3个抗真菌蛋白基因已整合到水稻基因组中,初步抗性鉴定表明RO代转基因水稻植株对稻瘟病菌的抗生有所提高。 相似文献
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将苗龄为5-7天的甘蓝子叶柄下胚轴分别培养于再生率很高的两个培养其中。当培养7-10天时,通过基因枪轰击,进行GUS基因的转移,结果表有,GUS基因导入了甘蓝细胞并进行了瞬间表达。 相似文献