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1.
构建T7噬菌体展示禽流感病毒抗原变异性基因片段文库. 首先, 从Gene Bank中查找筛选禽流感病毒抗原变异性基因, 将其截短、 修饰、 简并后得到禽流感病毒抗原变异性基因微阵列. 其次, 将合成的禽流感病毒抗原变异性基因片段文库扩增、 酶切, 链接到双酶切后的T7噬菌体载体基因上, 构成重组噬菌体DNA. 最后, 重组噬菌体DNA经体外包装和扩增, 得到T7噬菌体展示文库, 并进行T7噬菌体展示文库滴度、 重组率和免疫活性测定. 实验结果表明, 从Gene Bank中查找、 筛选、 剪切和修饰共获得96 258条序列构建T7噬菌体展示文库, 原始文库滴度为3.6×107个菌落/mL, 重组率大于90%. 用禽流感病毒H5N1抗体进行捕获, 经聚合酶链式反应(PCR)鉴定, 得到理想目的条带, 证明噬菌体表面展示蛋白具有抗原活性, 可用于禽流感病毒感染患者的快速检测及抗原表位筛选. 相似文献
2.
3.
4.
按照布鲁姆的教育理论对“细菌和噬菌体的重组与连锁”一章的教学进行改革,明确教学目标,从基本概念出发,引导学生如何观察实验现象,如何进行分析和假设,最后得出重要结论,从而探讨在教学中如何提高学生的创造性思维能力和学习的主动性. 相似文献
5.
实验测定了pH对Bacilusthuringiensisvar.entomocidus温和噬菌体TP3存活与吸附效率的影响作用。结果表明:在不同pH的介质中,TP3存活的能力相差很大;酸性介质及高碱性介质对TP3都有不同程度的瞬间灭活作用;TP3存活的最适pH为7.7,且适宜其存活的pH范围很窄;pH不同,TP3吸附到苏云金芽孢杆菌表面上的效率也不同,在pH≥9范围内,pH升高,吸附效率降低。 相似文献
6.
为了建立蛋白质亲和配基的高效筛选方法,以淀粉酶为靶分子,利用交替洗脱法从七肽噬茵体展示库中筛选具有高亲和力的噬茵体配体.结果表明,交替洗脱法筛选出的特异性配体的回收率和ELISA信号值均优于酸洗脱法;采用交替洗脱法能够更加有效和迅速地筛选到淀粉酶的高亲和力配体.分析筛选得到的不同噬茵体克隆DNA插入片断的氨基酸序列,发现了可能与配体高亲和性有关的氨基酸残基. 相似文献
7.
试验将已知大肠杆菌噬菌体为阳性的同批新生牛血清,分别用剂量为4、8、12、18、24、28,32、40、44、48kGy的60Coγ射线辐照,检测其中的大肠杆菌噬菌体、总蛋白含量及对促Vero细胞生长效应的影响,以观察辐射对新生牛血清的影响.结果表明,当剂量大于等于8kGy时,噬菌体结果均为阴性;当辐射剂量为8、12、24、28、32、40、44、48kGy时,血清总蛋白含量无明显差异(P>0.05);当辐照剂量大于等于16kGy时Vero细胞最大增殖浓度随辐照剂量的增大而降低;倍增时间在8kGy、16kGy、24kGy时没有显著变化 从32kGy开始倍增时间增加 提示用60Coγ射线辐照可使阳性大肠杆菌噬菌体的牛血清转阴,在小于16kGy时对促细胞生长试验无影响;在大于24kGy时对细胞的分裂增殖有影响,并且随辐照剂量的增大影响程度严重 相似文献
8.
9.
酶体外定向进化(Ⅲ)展示技术及其应用 总被引:3,自引:0,他引:3
利用展示技术构建的蛋白质/多肽的突变体库,可以通过高通量进行高效地分析和筛选,因此特别适用于改造蛋白质.文中综述噬菌体、细胞表面、核糖体、mRNA等展示技术的原理和方法,以及其在酶定向进化中的应用. 相似文献
10.
目前国际和国内筛选蛋白所用的技术主要是噬菌体展示技术和酵母双杂交技术。噬菌体展示技术在抗体的筛选方面已显示出良好的应用前景。本实验应用噬菌体展示技术展示出血栓病人的抗体,形成对血栓病人的抗体库。并从中淘选出能与血栓降解产物之一的D-二聚体有特异结合作用的抗体Fabp13。抗D-二聚体的Fab在XL1-Blue中得到可溶表达。再利用抗D-二聚体抗体进行竞争ELISA检验,证实p13具有抗D-二聚体的活性。从而我们筛选得到了抗D-二聚体抗体Fab p13。 相似文献