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1.
斜带石斑β-珠蛋白cDNA的克隆和序列分析 总被引:2,自引:0,他引:2
从斜带石斑EpinephelusCoioides白细胞cDNA库随机挑取噬菌斑,做为模板,用λTriplEx5'3'长距离插入子筛选引物,进行插入片断的PCR扩增,并进行表达序列探针(ESTs)测定。从中克隆到了血红蛋白β亚基cDNA,cDNA包含长达444bp的开放阅读框,编码147个氨基酸的多肽。用www.expasy.ch网站的compute pI/MW程序计算其可能的相对分子质量为16544,等电点为6.95。其氨基酸序列与草鱼β-珠蛋白Ⅲ的同源性最高,为73.0%。在远端和近端的与血红素结合的组氨酸都是保守的,另外,与其它鱼类及蛙,鸡和人的β-珠蛋白比较,在血红素结合区及亚基结合区的氨基酸残基均是高度保守的。 相似文献
2.
适用于我国小麦品质育种的SDS—PAGE方法 总被引:8,自引:0,他引:8
本文根据多年来实验室工作的经验,采用国产的仪器设备和药品,提出了在182mm×95mm的凝胶上,一次可装载100个样品,每次点样只需1.5-2μl,用于HMW麦谷蛋白亚基分析的SDS—PAGE方法。该方法具有分辨率高,经济性好,简单易行的特点。特别适于小麦育种计划中对大量品系进行HMW麦谷蛋白亚基分析及利用“半粒法”进行HMW麦谷蛋白亚基分析。 相似文献
3.
利用SDS-PAGE和HPLC-荧光检测法对大豆含硒蛋白或多肽进行分离和硒含量测定,在“〉2SD”为含硒条带的约定下,从所采集恩施,北京,启东样品中分别检出了19,12和10条含硒蛋白或亚基条带,并初步估算了它们的分子量和含硒量,根据这些蛋白条带的归属分析,发现3个地区样品大豆乳清蛋白结合硒的量最多,11S组分结合硒的量次之,7S组分结合硒的量最少,经过对不同硒含量样品进行比较后认为,大豆乳清蛋白 相似文献
4.
利用免疫细胞化学的方法和电镜技术观察红螯螯虾感光器中Gq蛋白α亚基的亚细胞定位,结果表明Gqα以膜结合形式定位于感杆束和以可溶性形式定位于细胞质中,Gqα定位的变化依赖于不同的光照条件.在暗适应后,Gqα主要分布于感杆束,细胞质中很少,感杆束与细胞质中胶体金颗粒的密度比为1.44±0.074;在(日)光适应后,密度比减少为0.61±0.021;在不同波长的光照处理后,Gqα定位有差异,感杆束与细胞质中胶体金颗粒的密度比由高至低,依次为绿光(1.64±0.046)、红光(1.28±0.036)、蓝光(1.16±0.111)和黄光(0.96±0.099).光调节的Gqα转位可能控制了能被视紫红质激活的Gq蛋白的数量.研究表明光波可影响感光细胞中膜结合和可溶性Gqα的比例,而这一结果可能是由被光激活的视紫红质的数量来控制的. 相似文献
5.
NADH泛醌氧化还原酶是动物体内呼吸链电子传递系统的第一个酶,克隆水稻害虫褐飞虱的NADH泛醌氧化还原酶基因,及研究其在褐飞虱与水稻互作中的表达变化,将为科学防治褐飞虱提供新的线索。利用反转录多聚酶链式反应(RT-PCR)技术克隆了褐飞虱NADH泛醌氧化还原酶51kDa亚基基因的cDNA片段,并进行了序列测定;使用NoRhem杂交技术检测了该基因对两种不同抗性水稻的分子反应。分子杂交结果表明,在取食抗性水稻品种B5后,褐飞虱的NADH泛醌氧化还原酶51kDa亚基基因表达水平明显升高,而取食感虫水稻TN1后,该基因的表达水平没有明显变化。 相似文献
6.
小麦谷蛋白亚基对品质性状的影响 总被引:1,自引:0,他引:1
以61个小麦品种为材料,利用方差分析探讨了3个高分子量麦谷蛋白基因座和2个低分子量麦谷蛋白基因座对14个小麦主要品质性状的影响.研究结果显示:同一基因座可以影响多个品质性状;不同基因座对不同品质性状的影响是不同的;影响的大小也存在差异.特别应该强调的是,有些品质性状同时受到两个基因座的影响,有时基因座间互作的影响大于单个基因座效应的影响.本研究结果说明,小麦品质性状的改良是非常复杂的,对不同品质性状的改良应采用不同的育种策略. 相似文献
7.
小麦谷蛋白亚基的快速提取分离及SDS-PAGE分析 总被引:5,自引:0,他引:5
用70%乙醇和50%异丙醇除去醇溶蛋白,以二硫苏糖醇(DTT)为还原剂,在50%异丙醇,0.08mol/L Tris-HCl(pH为8.0)缓冲液中提取总麦谷蛋白亚基,加入丙酮至浓度为40%时,高分子量麦谷蛋白亚基(HMW-GS)沉淀析出;继续加入丙酮至80%时,析出低分子量麦谷蛋白亚基(LMW-GS).在3.3%浓缩胶和10%分离胶的不连续体系中进行SDSPAGE电泳,结果表明,该方法可以有效地除去醇溶蛋白对麦谷蛋白亚基电泳分析的背景干扰,HMW-GS和IMW-GS的提取、分离一步完成,操作简便,时间短,对大量小麦样品的HMW-GS和LMW-GS可以快速分离、提纯和鉴定. 相似文献
8.
Gq蛋白是大多数无脊椎动物感光器中光信号传导中酶反应链的第二信使.本文用免疫印迹的方法研究了日本沼虾感光器中Gqa的存在,并应用免疫电镜技术观察了Gq蛋白在其感光器中亚细胞的分布,为研究Gq蛋白在光信号传导中的作用提供新的依据. 相似文献
9.
细胞周期抑制因子p21能影响G1/S期转换和G2/M期进程,进而抑制细胞增殖.p21表达增高可以抑制多个DNA复制相关基因表达.DNA聚合酶δ是DNA复制中最为重要的复制酶,p21是否抑制它的表达,并通过这种作用影响细胞增殖及细胞恶性表型的变化,至今还没有报道.本研究观察到p21表达增强的MCF7p21细胞生长速率变慢,血清依赖性增强,细胞的锚定和非锚定依赖性增殖都受到抑制,表明p21表达增加对细胞增殖和细胞恶性表型的产生有重要作用.而Western blot检测发现在p21表达增高的MCF7p21细胞中,聚合酶δ(p125亚基)表达下降.p21高表达抑制POLD1启动子活性,这种抑制作用具有p21剂量依赖效应.这表明p21表达增高对细胞增殖的抑制和细胞恶性表型的影响可能是通过抑制在DNA复制中最重要的聚合酶δ(p125)的表达来实现的.这可能是p21对细胞增殖及恶性表型影响的一个新的调控机制. 相似文献
10.
从层理鞭枝藻藻红蓝蛋白α亚基基因表达质粒pGEMD-pecA出发,通过酶切、削平或补充补末端及重新环合等技术,使其后的阅读框发生移码突变,从而到C-端缺失24个和36个氨基酸的两个缺失突变体pGEMD-pecA-C24和pGEMD-pecA-C36,用PCR技术将已突变的基因片段转入表达载体pET30中,得到pET30-pecA-C24和pET30-pecA-C36,获得高效表达,利用PCR技术从pGEMD-pecA中扩增出N-端缺失20个和32个氨基酸pecA的突变基因片段,并克隆于表达载体pET30中,得到pET30-pecA-N20和pET30-pecA-N32,获得高效表达,两个C-端缺的突变的脱辅基蛋白无论有或无藻红蓝蛋白连接/异构酶催化,均不能与藻蓝胆素共价偶联,两个N-端缺失突变脱辅基蛋白均能在藻红蓝蛋白连接/异构酶催化下与藻蓝胆系共价偶联,且色素从藻蓝胆素转化为藻紫胆素。 相似文献