D-半乳糖诱导大鼠肺微血管内皮细胞衰老

探讨了D-半乳糖(D-galactose, D-gal)诱导的大鼠肺微血管内皮细胞(pulmonary microvascular endothelial cells, PMVECs)衰老与细胞凋亡的关系. 以含D-gal(10 g/L)DMEM培养液培养PMVECs, 经内皮细胞鉴定后, 再通过下述鉴定建立了大鼠PMVECs衰老模型: (1) 约90%的细胞呈现b-半乳糖苷酶活性阳性染色; (2) 流式细胞仪检测可见细胞周期分布变化, 90%细胞停留在G0/G1期, 而S期和G2/M期细胞近于消失. 与未诱导的对照组细胞比较得到如下结果: (1) 荧光显微镜和透射电子显微镜观察, 可见D-gal诱导的PMVECs细胞核染色质浓缩和凝聚, 并可见凋亡小体; (2) 流式细胞仪检测Annexin V /PI双染色的D-gal诱导的PMVECs中, 早中期凋亡细胞明显增加, 其细胞凋亡率为(39.8±2.8)% (对照组为(14.0±3.7)%); (3) PMVECs在衰老终末阶段出现典型的晚期凋亡亚二倍体峰. 实验表明: D-gal可诱导体外培养的PMVECs老化, 从而复制细胞衰老. 经D-gal诱导的衰老PMVECs易发生凋亡, 提示细胞凋亡参与了D-gal诱导细胞衰老的过程.     

阿拉伯半乳糖蛋白在茉莉花粉萌发和花粉管生长中的作用研究

阿拉伯半乳糖蛋白(arabinogalactan proteins, AGPs),是一类具有繁杂构造的糖蛋白，遍及于植物的不同组织中.大量研究表明，AGPs在花粉的黏附、水合、萌发和花粉管在花柱内极性生长过程中都起着重要作用.采用花粉离体培养技术，对AGPs与其抑制剂β葡萄糖基-Yariv试剂(β-D-glucosyl-Yariv reagent,βGlcY)结合后，茉莉花粉萌发和花粉管生长的情况，以及去除抑制剂后，花粉管再生情况进行了研究，以探明AGPs是否对茉莉花粉萌发和花粉管生长起作用.结果表明：Yariv试剂在处理后1～2 h内能明显抑制茉莉花粉萌发和花粉管的生长，花粉萌发率和花粉管生长速度与对照相比都显著下降；去除抑制剂后，茉莉花粉管可恢复正常生长能力，故AGPs在茉莉花粉萌发和花粉管生长过程中起着重要的促进作用.研究结果对提高茉莉花粉活力、促进花粉管生长以克服结实障碍、提高结实率有重要的指导意义.     

D-半乳糖致衰老小鼠学习记忆能力和睾丸的改变及延衰合剂的治疗作用

目的研究D-半乳糖所致亚急性衰老小鼠学习记忆能力和睾丸的变化,并观察延衰合剂对其的治疗作用。方法选昆明系雄性小鼠,用D-半乳糖建立亚急性衰老模型。应用Morris水迷宫实验测试衰老小鼠学习记忆能力的变化;电镜技术观察延衰合剂治疗后衰老小鼠睾丸的形态学改变;酶联免疫分析法检测血清睾酮的变化。结果衰老小鼠学习记忆能力下降,睾丸重量减少,生精细胞减少,结构紊乱,功能障碍,血清睾酮含量明显降低。在改变学习记忆能力上延衰合剂高剂量组作用明显优于延衰合剂低剂量纽（P〈0．05）,但与补肾益寿胶囊纽及延衰舍剂中荆量组差畀无显著性（P〉0．05）。结论延衰舍剂可以提高衰老小鼠学习记忆能力,改善睾丸生精小管的超微结构,抑制衰老小鼠血清睾酮含量的下降,具有一定的延缓衰老作用。     

延衰合剂对D-半乳糖诱导的亚急性衰老小鼠免疫功能影响的实验研究

目的 研究延衰合剂( yanshuai mixture,YSM)对D-半乳糖所致亚急性衰老小鼠胸腺、脾脏组织结构及白介素2水平的影响.方法 选昆明系小鼠,用D-半乳糖建立衰老模型.应用光镜、电镜技术观察延衰合剂治疗前后衰老小鼠胸腺、脾脏的形态学改变;检测胸腺指数及脾脏指数;酶联免疫分析法检测血清白介素2的变化.结果 衰...     

牛奶中菌群间相互作用的时滞模型

考虑牛奶中营养物质乳糖与乳酸菌、酵母菌相互转化的转化时间,建立了牛奶中菌群相互作用的时滞模型,并利用微分方程定性分析的方法,给出了非负平衡点的稳定性条件.     

藏灵菇发酵乳对D-半乳糖衰老小鼠脑组织NOS和NO的影响

通过建立D-gal人工衰老小鼠模型并进行藏灵菇发酵乳灌胃处理,测定小鼠脑指数;同时测定脑组织中总一氧化氮合酶(TNOS)、抑制性一氧化氮合酶(iNOS)活性和一氧化氮(NO)的含量变化,进一步研究藏灵菇发酵乳的抗衰老作用及其机理.结果表明藏灵菇发酵乳能明显增加脑指数,降低脑组织TNOS和iNOS活性,极显著降低NO的含量.证明藏灵菇发酵乳具有显著减少强氧化剂产生,减少脑组织氧化损伤,从而发挥抗衰老作用.     

健脑益寿胶囊对衰老模型小鼠体内LPO的影响

观察健脑益寿胶囊的抗衰老作用,并初步探讨其作用机理.选用6月龄小鼠随机分为6组,分别为健脑益寿胶囊高、中、低剂量组、模型组、维生素E组、空白对照组.另取2月龄小鼠10只,作为青龄对照组.除空白对照组、青龄空白组外均颈背部sc给予D-半乳糖,剂量为120 mg/kg,造成衰老模型,并同时灌胃给予健脑益寿胶囊高、中、低3个剂量组健脑益寿胶囊,剂量分别为3.744、1.872、0.936 g/kg,维生素E组灌胃给予维生素E,剂量为20 mg/kg(模型组不给药),连续造模、给药6周,6周后处死小鼠,分别测定心、肝组织的脂质过氧化产物(LPO)含量.健脑益寿胶囊可不同程度降低D-半乳糖所致衰老小鼠心、肝组织的LPO含量.健脑益寿胶囊能降低体内脂质过氧化产物的含量,具有明显的延缓衰老作用,其抗衰老作用机理可能与其降低体内脂质过氧化产物的含量有关.     

pET-11b-rhIL-6/BL21(DE3)工程菌高密度发酵工艺研究

以甘油作为碳源、乳糖为诱导剂的发酵方法,平均表达量可达21.91%±5.64%,平均生物量可达338.00 g±77.30 g;以葡糖糖为碳源、IPTG诱导法,平均表达量21.35%±4.94%、平均生物量191.18 g±32.09 g);而以葡糖糖为碳源、乳糖为诱导剂的方法平均生物量可达319.00 g±63.98 g,但表达量只有13.57%±4.56%.     

Paenibacillus sp.K1 α-半乳糖苷酶酶学性质

利用CODEHOP PCR和Anchor-ligated PCR方法从类芽孢杆菌Paenibacillus sp.K1中克隆得到一个α-半乳糖苷酶基因aga P1,大小为2 190 bp,同源性分析显示,该基因与其他α-半乳糖苷酶基因的序列相似低,是一个新的α-半乳糖苷酶基因。将aga P1在大肠杆菌Origami B(DE3)中表达并纯化获得Aga P1,酶学性质分析显示:以p NPG为底物时,Aga P1最适反应温度为40℃,最适p H 6.5~10,Km值为0.75 mmol/L,最大反应速率Vmax为1.96μmol·min-1·mg-1。同时Fe2+、Mg2+、Ca2+、K+和甘油能使α-半乳糖苷酶酶活提高1~3倍,而Cu2+、Zn2+、Fe3+和还原型谷胱甘肽则抑制该酶的活性。SDS-PAGE检测Aga P1蛋白大小约为80 ku,与理论预测值基本一致;Native-PAGE分析表明正常条件下Aga P1蛋白以二聚体或六聚体形式存在。以上结果显示,Paenibacillus sp.K1产生的α-半乳糖苷酶为一个新的低温α-半乳糖苷酶。