脂多糖对RAW264.7细胞IL-10分泌及mRNA表达的影响

目的探讨脂多糖（LPS）对RAW264．7细胞白细胞介素10（interleuldn-10，IL-10）分泌及mRNA表达的影响。方法采用体外培养巨噬细胞株RAW264．7细胞，实验分为正常对照组、LPS组。采用ELISA法、逆转录PCR（RT—PCR）技术检测IIJ-10分泌及mRNA表达的变化。结果LPS刺激RAW264．7细胞后IL-10的分泌及mRNA表达较对照组增加（P〈0．05），并具有时间依赖性。结论LPS可刺激RAW264．7细胞IIJ—10分泌及mRNA表达的增加。     

AF-1对内毒素诱导RAW264．7细胞IL-10表达的影响

目的探讨抗炎素-1（Antiflammin-1,AF-1）对脂多糖（LPS）诱导的RAW264．7细胞白细胞介素10（interleuki-10,IL-10）表达的影响。方法采用体外培养巨噬细胞RAW264．7细胞,实验分为正常对照组,LPS组和不同浓度的LPS＋AF-1组。应用逆转录PCR（RT—PCR）技术检测IL-10表达的变化。结果1μg／ml的LPS刺激RAW264．7细胞后IL-10的表达较正常对照组增加（P〈0．05）,LPS＋AF-1组IL-10表达较LPS组表达显著升高（P〈0．05）,并具有剂量依赖性结论AF-1可促进LPS诱导的RAW264．7细胞IL-10表达的增加。     

细菌内毒素检查法在人血白蛋白中的应用研究

报告了用细菌内毒素检查法代替家兔法对人血白蛋白进行热原质检查的研究结果。在半成品检查中,两种方法的符合率达97.87％;在成品实验室验证中,符合率为100％。并提出了人血白蛋白细菌内毒素限值应小于0.025EU/mg,遇结果难判定者应经家兔法判定。     

用全血或细胞替代家兔进行热原检查的方法研究

热原检查是药物注射剂及输注用品质量控制的一个重要指标 ,目前普遍采用的方法是家兔法和鲎试验法。由于两种方法都存在缺陷并受到资源的限制 ,寻找新的替代家兔热原试验方法势在必行。我们对用家兔血浆、人血浆以及THP 1检测热原的可行性进行了初步探索。其原理是 :分别将细菌内毒素标准品与从健康家兔取出的肝素抗凝全血、健康自愿者提供的人肝素抗凝全血以及THP 1细胞共同孵育后 ,用ELISA双抗夹心法测定其产生的细胞因子TNF α和IL 6的释放量 ,作为内源性检测指标来判定内毒素的致热作用。结果表明 :无论兔全血、人全血还是THP 1…     

138例肝硬化腹水鲎试验观察与临床研究

目的 探讨鲎试验在诊断肝硬化腹水并发自发性细菌性腹膜炎(SBP)中的应用价值及抗菌素用药方案.方法 连续收集2008年2月至2013年12月138例肝硬化腹水的住院患者,其中22例合并有SBP,按腹水的鲎试验反应结果分组:腹水鲎试验阴性组SBP发生率为2.9%,弱阳性组(+~++)SBP发生率为12.3%,强阳性组(++~++++)SBP发生率为34.2%,三组间两两比较;鲎试验阳性103例,按单双日随机分两组(A组60例,B组43例)分别选用不同抗生素治疗方案.结果 弱阳性组与阴性组比较,组间差异无统计学意义(>0.05),强阳性组与阴性组比较、强阳性组与弱阳性组比较,组间差异具有统计学意义( <0.05);鲎试验阳性103例,A、B两组不同抗菌素治疗方案比较,组间差异无统计学意义( >0.05).结论 鲎试验强阳性可以作为腹水感染的诊断指标;腹水内毒素疗效与不同抗菌素用药方案无关.     

内毒素致家兔发热模型的研究

目的:建立家兔发热模型.方法:模型组于家兔小脑延髓池内分别注射0.05μ g/kg(A)、0.075μg/kg(B)、0.1μg/kg(C)、0.25μg/kg(D)大肠埃希菌内毒素,空白组于家兔小脑延髓池注射等量的生理盐水,连续测量体温,观察一般状态.结果:从模型组发热过程看,均有体温上升期、高热期和体温下降期,其高热阶段和体温下降阶段时程长,而体温上升阶段时程短,认为与本研究采用小脑延髓池内直接注入LPS有关.4个模型组的发热过程符合人体疾病的发热过程.从发热程度看,4个模型组发热高峰值接近人体疾病时的中、高热的幅度.从一般状态看,具有与发热过程相关的伴随症状.结论:此方法研制家兔发热模型稳定易行、可重复,模型组随LPS注射剂量的增加家兔发热反应增强,LPS注射剂量不同发热峰型不同,A、B组为单峰热型,C、D组为高热平台型,LPS注射剂量可以根据需要选择.     

The effect of endotoxin on membrane fatty acid composition in BCG-sensitized mice

Summary The effects of endotoxin on mouse liver phospholipid fatty acid composition have been investigated. Administration of endotoxin fromSalmonella abortus equi led to a decrease in the polyunsaturated fatty acid content of livers from mice sensitized with Bacille Calmette Guérin (GCG). The content of arachidonic acid fell significantly in both the phosphatidylcholine and phosphatidylinositol fractions whereas in the phosphatidylethanolamine fraction the linoleic acid content was significantly reduced. The polyunsaturated fatty acids were replaced by increased amounts of oleic acid and palmitic acid, leading to a reduction in the polyunsaturated to saturated fatty acid ratio.     

细菌内毒素诱导人肺腺癌细胞凋亡的实验研究

为了探讨细菌内毒素对人肺腺癌细胞株A549的影响及细胞凋亡与肿瘤坏死因子的关系,用含有细菌内毒素1000EU/mL、500EU/mL、100EU/mL、50EU/mL、0EU/mL的MEM细胞培养液来培养A549细胞,通过细胞计数来绘制细胞生长曲线,并用台盼兰拒染率测定细胞活率、用DNA梯形条带法及TUNEL原位法检测细胞凋亡情况.结果显示,细菌内毒素对肺癌细胞A549生长有明显的抑制作用,且呈剂量依赖性,此种抑制是通过诱导细胞凋亡达到的.肿瘤坏死因子检测结果没有发现规律性.表明内毒素在体外可以诱导肺腺癌细胞的凋亡,且存在明显的剂量关系,并且此凋亡不是依赖TNF-α途径发生的,为临床上通过诱导细胞肿瘤细胞凋亡,从而为预防和治疗肿瘤提供了理论依据.     

用弃G因子鲎试剂进行维脑路通注射液中的细菌内毒素检测研究

用弃G因子鲎试剂检测维脑路通注射液中的细菌内毒素,取维脑路能注射液用10倍稀释液将细菌内毒素工作品配制成为1．0,0.5,0.25,0.125EU/ml的稀释液,再与弃G因子鲎试剂反应,结果灵敏度为0．5－2．0λb,维脑路通注射液10倍稀释液对灵敏度为0．5EU/ml的弃G因子鲎试无干扰,故可用鲎试剂法代替其他热原检查法。     

Putting endotoxin to work for us: Monophosphoryl lipid A as a safe and effective vaccine adjuvant

The development of non-infectious subunit vaccines greatly increases the safety of prophylactic immunization, but also reinforces the need for a new generation of immunostimulatory adjuvants. Because adverse effects are a paramount concern in prophylactic immunization, few new adjuvants have received approval for use anywhere in the developed world. The vaccine adjuvant monophosphoryl lipid A is a detoxified form of the endotoxin lipopolysaccharide, and is among the first of a new generation of Toll-like receptor agonists likely to be used as vaccine adjuvants on a mass scale in human populations. Much remains to be learned about this compound’s mechanism of action, but recent developments have made clear that it is unlikely to be simply a weak version of lipopolysaccharide. Instead, monophosphoryl lipid A’s structure seems to have fortuitously retained several functions needed for stimulation of adaptive immune responses, while shedding those associated with pro-inflammatory side effects. Received 25 April 2008; received after revision 05 June 2008; accepted 10 June 2008