荧光法测定Ce^3＋与tRNA的结合常数

与其它稀土离子的自身荧光相比,稀土Ｃｅ３＋水合离子的荧光要强得多,并且在很宽的浓度范围内与其浓度成很好的正比关系,因此可以用来确定Ｃｅ３＋离子的浓度．ｔＲＮＡ非常强烈地猝灭Ｃｅ３＋水合离子的荧光．采用荧光滴定的方法研究了Ｃｅ３＋－ｔＲＮＡ体系,并用Ｓｃａｔｃｈａｒｄ方法测量了Ｃｅ３＋离子和ｔＲＮＡ的结合数和结合常数,结果发现：ｔＲＮＡ中有２组Ｃｅ３＋结合位置,其结合常数分别为约１０８ｍｏｌ／Ｌ和１０５ｍｏｌ／Ｌ．向体系中加入精胺可使结合数和结合常数稍微降低．     

地衣芽孢杆菌A.4041耐高温α-淀粉酶色氨酸残基和巯基的化学修饰

用N-溴代琥珀酰亚胺（NBS）和N-乙基丁二酰亚胺（NEM）分别对A．4041α-淀粉酶的主要组分α－Ⅲ的色氨酸（TrP）残基和巯基进行修饰．结果表明，50％的Trp残基被NBS修饰，可使酶活力完全丧失；Ca2+和底物可减少修饰酶的失活；加Ca2+或底物后修饰酶的荧光强度较对照修饰酶有显著提高．表明Trp是催化必需基团，并与结合底物和Ca2+有关．用过量NEM修饰巯基，酶活力改变不大，表明巯基不是酶的催化必需基因，并对酶的热稳定性基本无影响．     

色氨酸在 Toyopearl HW-40S 凝胶填料上非理想排阻行为的研究

发现１８种氨基酸特别是色氨酸．在ＴｏｙｏｐｅａｒｌＨＷ－４０Ｓ树脂所填色谱柱上表现出非理想排阻行为的基础上，以色氨酸在该柱上的保留时间为指标，探讨不同流动相改良剂对该凝胶与色氨酸之间的相互作用，阐明这种反常行为是疏水作用，离子交换以及氢键三者综合作用的结果，而疏水作用是最主要的影响因素．实验结果表明，流动相组成对该凝胶色谱行为具有明显的影响，从而有助于确立该凝胶理想的排阻色谱条件，为利用该凝胶所具有的吸附性能分离分析肽类和氨基酸等小分子物质奠定了基础     

荧光猝灭法测定铕

研究了不同条件下Eu^3 与色氨酸的荧光光谱性质，实验发现Eu^3 对色氨酸的自体荧光具有显著的猝灭作用，结果表明，在pH 10．6的三酸缓冲介质中，色氨酸的荧光猝灭程度与Eu^3 浓度呈良好的线性关系，据此建立了荧光猝灭法测定Eu^3 的新方法．该方法用于样品测定，操作简便、重现性好、灵敏度高．     

枯草杆菌TrpRS与小螺旋DNA的紫外光定点交联

为研究枯草杆菌色氨酰－tRNA合成酶（TrpRS）与小螺旋DAN的相互识别及其结构与功能的关系,人工合成了4种小螺旋DNA（其中3种在不同位点带有光化学交联试剂s^4T）,纯化了枯草杆菌TrpRS,设计制作紫外交联仪,进行了TrpRS与小螺旋DNA的紫外光定点交联实验,优化了紫外交联条件,实验结果表明,小螺旋DNA分子中对应于tRNAT^rp73,72位的碱基与TrpRS有直接的相互作用,而对应于tRNA^Trp55位的碱基与TrpRS无直接的相互作用,紫外交联产物的量与紫外光照射剂量、TrpRS浓度、小螺旋DNA浓度呈正相关。     

水稻线粒体tRNATrp的种属特异性氨酰化

为了研究原核生物和真核生物（细胞质）色氨酰tRNA合成酶（TrpRS）对线粒体tRNA^Trp识别的种属特异性,构建了7个水稻线粒体tRNA^Trp三位点（G73,U72,A68）的单点或多点突变的突变体．这些突变基因,经体外转录后分别用枯草杆菌（B．subtilis）和人色氨酰tRNA合成酶（TrpRS）进行氨酰化反应,并测定它们的动力学常数．结果表明,与野生型水稻线粒体tRNA^Trp相比,7个突变体的转录产物被B．subtilis TrpRS氨酰化的活力分别降低了53．33％-99．79％,被人TrpRS氨酰化的活力却分别提高了4～330倍,其中以MPH7（水稻线粒体tRNA^Trp的三碱基（G73,U72和C68）全部突变为人tRNA^Trp的三碱基序列）的氨酰化活力改变最大．实验结果证明,与真核生物和原核生物细胞质tRNATrp的种族特异性类似,水稻线粒体tRNA^Trp的种属特异性元件也主要处于氨基酸接受茎的识别位碱基、第一和第五对碱基对,亦即识别位碱基G73,氨基酸接受茎上的两个碱基对G1／U72和U5／A68．本研究为线粒体tRNA^Trp起源于真细菌的推论提供了实验依据．     

高效液相色谱法同时测定树鼩脑组织中的去甲肾上腺素,多巴胺,5-羟色胺及色氨酸

应用高效液相色谱(HPLC)--荧光检测,在一根带有预柱的LKB Superpac ODSC_(18)钢柱上,使用离子对系统做为洗脱液,对一组正常活动规律的树鼩脑组织液中的去甲肾上腺素(NE)、多巴胺(DA)、5-羟色胺(5-HT)及色氨酸(TRP)进行测定。荧光检测的波长为激发波长280nm,发射波长360nm得到各物质最小检测限量为:40ng NE和80ngDA(信噪比3:1)以及10ng5-HT和15ng TRP(信噪比4:1)。此方法具有实验操作简单、方便、快速、灵敏度较高、样品易于处理等特点。     

竹红菌乙素对肌质网Ca~(2+)-ATP酶蛋白色氨酸荧光猝灭研究

肌质网Ca~(2+)-ATP酶是一种重要的膜蛋白酶,它在肌细胞的收缩舒张功能中起重要作用,因而其动力学行为被广泛地研究,但是有关结构与功能之间关系的直接实验数据仍然不足.为了从分子水平上阐明Ca~(2+)-ATP酶催化原理,1993年Ferrira用荧光猝灭方法首先观察了肌质网Ca~(2+)-ATP酶在加入Ca~(2+)前后分子构象的变化.由于作者使用的猝灭剂是分子氧,除了在测定工作中使用不方便之外,灵敏度也不够高.为此本文用竹红菌乙素作为肌质网Ca~(2+)-ATP酶荧光猝灭剂,分别测定了该酶在有钙或无钙的条件下荧光猝灭的情况,结果证明竹红菌乙素可以在稳态和瞬态的条件下观察到体系中有钙或无钙时的荧光猝灭常数变化的情况(即不同的K_q值);进而说明了竹红菌乙素作为肌质网蛋白荧光猝灭剂可以得到比氧更多的信息和许多其他优点.     

利用复杂网络来研究tRNA序列的进化

根据点突变和互补复制的进化机制构建tRNA序列相似度平行网络和反平行网络并研究了网络的特征．分析发现当相似度很大时，tRNA基因网络出现了无标度（scale—free）的特征．其次，还比较了平行网络和反平行网络的特征，发现在相同的条件下，反平行网络中的tRNA序列间的关系比平行网络中更密切，它们之间的相似程度更高．这同时说明现代tRNA序列由互补复制机制进化的可能性更大．最后根据点突变和互补复制的进化机制建立了一个粗糙的tRNA进化模型．结果发现模型tRNA相似度网络在0．3≤ε≤0．5条件下，不仅和真实tRNA相似度网络有局部的相似行为，而且网络的整体行为也是相似的．因此现代tRNA序列的合理的进化机制应该是上述两种机制的混合．     

利用复杂网络来研究tRNA序列的进化

根据点突变和互补复制的进化机制构建tRNA序列相似度平行网络和反平行网络并研究了网络的特征.分析发现当相似度很大时,tRNA基因网络出现了无标度(scale-free)的特征.其次,还比较了平行网络和反平行网络的特征,发现在相同的条件下,反平行网络中的tRNA序列间的关系比平行网络中更密切,它们之间的相似程度更高.这同时说明现代tRNA 序列由互补复制机制进化的可能性更大.最后根据点突变和互补复制的进化机制建立了一个粗糙的tRNA进化模型.结果发现模型tRNA相似度网络在0.3≤ξ≤0.5条件下,不仅和真实tRNA相似度网络有局部的相似行为,而且网络的整体行为也是相似的.因此现代tRNA序列的合理的进化机制应该是上述两种机制的混合.